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小鼠單核巨噬細胞白血病細胞;RAW 264.7 RAW264.7
公司專注于細胞培養及細胞銷售的細胞生物學技術研發的高科技企業,主要擁有復蘇及凍存細胞及相關技術服務,公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、雜交瘤細胞株;23-1技術培訓、售后服務,其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內外細胞研究機構建系。
細胞名稱 雜交瘤細胞株;23-1
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
雜交瘤細胞株;23-1處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經過滅菌處理的)培養瓶外部。
2、肉眼觀察培養基,若出現渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續培養。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養液后置于37℃,5%CO 2的培養箱中繼續培養。若細胞密度達到80%以上或存在成團現象,建議用0.25%*消化后傳代培養。
5、如果細胞為凍存狀態,可將其繼續放入液氮中繼續保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養瓶中,再加入相應的細胞培養液,放于37℃培養箱中繼續培養。
細胞培養知識:
1.應如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉漿菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環境、與品質良好之細胞來源和培養 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發生微生物污染時,應如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經解凍后,為何會發生細胞數目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養時出現細胞數目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養時出現存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養基使用錯誤或培養基品質不佳。血清使用 錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
〖級別〗:BR
分子量:18.4kDa,單體
來源:大腸桿菌MRE-600細胞
濃度:2~5u/ul
活力定義:1個活性單位是指在37℃、20分鐘內催化產生1nmol酸性可溶產物所需的酶量
酶活性分析混合物:20mM Tris-HCL(PH7.8), 40mM KC1, 8mM MgCL2, 1mM DTT, 24uM[3H]-poly(A)poly(dT), 0.03mg/ml BSA, 4%(v/v)甘油
〖保存〗緩沖液組成:25mM HEPES-KOH(PH8.0), 50mM KC1, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 0.1mg/ml BSA, 50%(v/v)甘油
10×反應緩沖液:20mM Tris-HCL(PH7.8), 400mM KC1, 80mM MgCL2, 10mM DTT
質量控制:相關測試表明無內切或外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:重組酶,是一種核糖核酸內切酶,它能夠特異性地水解雜交到DNA鏈上的RNA磷酸二酯鍵,故能分解RNA/DNA雜交體系中的RNA鏈。該酶不能消化單鏈或雙鏈DNA。抑制劑有金屬螯合物、SH-封閉試劑
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:-20℃,如65℃加熱10分鐘會失活
核糖核酸酶T1
〖英文名稱〗:Ribonulease T1 from Aspergillus oryzae;Rnase T1
〖號〗:9026-12-4
〖級別〗:BR
分子量:11.2kDa,單體
來源:大腸桿菌細胞含有米曲霉(Aspergillus oryzae)來源的克隆基因rntA
濃度:1000U/ul
活力定義:1個活性單位是指37℃,pH7.5條件下,酵母RNA溶解水解15分鐘使其260nm波長吸光值增加1.0所需的酶量
酶活性分析混合物:50mM Tris-HCL(PH7.5), 2mM EDTA, 3mg/ml酵母RNA
〖保存〗緩沖液組分:50mM Tris-HCL(PH7.4)和50%(v/v)甘油
質量控制:相關測試表明無內切和外切脫氧核糖核酸酶、蛋酶污染,功能檢測方法為質粒DNA純化過程雜交瘤細胞株;23-1中的RNA降解(與RNase A協同作用)
抑制劑:金屬離子Mg2+、Ca2+、Zn2+、Fe2+、Cu2+(MgCL2, 100mM濃度時抑制效率約40%;CaCL2,10mM濃度時抑制效率約30%;Zn2+、Fe2+和Cu2+在1mM時抑制效果很強)、單核苷酸(2-GMP,3-GMP等)、guanilyl-2-5-鳥苷
失活:熱失活是可逆的,建議采用過柱純化或*/方抽提除去該酶
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:核糖核酸酶 T1是一種內切酶,在G殘基位點特異性降解單鏈RNA。該酶通過形成核苷2′,3′-環磷酸中間體來切割3′-鳥苷殘基與鄰近核苷5′-OH基團之間的磷酸二酯鍵。反應產物是3′-GMP末端寡核苷酸。RNase T1發揮活性無需金屬離子參與
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