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小鼠SRSV轉化的3T3細胞;SRSV/3T3

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更新時間:2017-06-09 13:58:39瀏覽次數:207次

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小鼠SRSV轉化的3T3細胞;SRSV/3T3
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公司專注于細胞培養及細胞銷售的細胞生物學技術研發的高科技企業,主要擁有復蘇及凍存細胞及相關技術服務,公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、小鼠SRSV轉化的3T3細胞;SRSV/3T3
技術培訓、售后服務,其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內外細胞研究機構建系。
細胞名稱 小鼠SRSV轉化的3T3細胞;SRSV/3T3
形態特性  圓形
生長特性 貼壁生長
特征特性  這株細胞是NIH/3T3細胞用SRS小鼠腹水瘤無細胞提取物感染并在體外傳代。 在感染過的NIH/3T3細胞的細胞質中發現了A型和C型病毒顆粒。 發現細胞中有逆轉錄酶和自由的白血病病毒前病毒-DNA。 用這個培養細胞對BALB/c裸鼠進行皮下接種,誘導生成纖維肉瘤。
培養條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清,10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件  *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類小鼠SRSV轉化的3T3細胞;SRSV/3T3
處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經過滅菌處理的)培養瓶外部。
2、肉眼觀察培養基,若出現渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續培養。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養液后置于37℃,5%CO 2的培養箱中繼續培養。若細胞密度達到80%以上或存在成團現象,建議用0.25%*消化后傳代培養。
5、如果細胞為凍存狀態,可將其繼續放入液氮中繼續保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養瓶中,再加入相應的細胞培養液,放于37℃培養箱中繼續培養。
細胞培養知識:
1.應如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉漿菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環境、與品質良好之細胞來源和培養 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發生微生物污染時,應如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經解凍后,為何會發生細胞數目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養時出現細胞數目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養時出現存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養基使用錯誤或培養基品質不佳。血清使用 錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。

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