我公司提供的輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒50管/24樣規格方法分類：紫外分光光度法、可見分光光度法、微量法、酶法、高效液相色譜法本方法提供代測服務!咨詢！
產品名稱：?輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒50管/24樣規格
規格：50管/24樣 測試方法：可見分光光度法

測定意義

輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循環（TCA）的主要氫受體，生成的NADH經呼吸電子鏈（ETC）傳遞把電子交給氧，在合成ATP的同時，形成大量的ROS，同時NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質三大代謝物質分解中的氧化反應絕大部分通過這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評價糖酵解和TCA循環的強弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說明細胞呼吸耗氧量較高，處于過氧化狀態。此外，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環。另外，NAD+降解產物對細胞信號傳導、代謝和基因表達等具有重要的調控作用。

測定原理

分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH，NADH通過PMS的遞氫作用，還原氧化型噻唑藍（MTT）為甲瓚，在570nm下檢測吸光值；而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH，進一步采用MTT還原法檢測。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒50管/24樣規格成及試劑配制
1：預包被板: 96T/48T
2：酶標記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1
3：標準品: -6 0.5mL x 2
4：EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5：標記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6：顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7：終止液: 1N 12mL x 1
8：濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1
輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒50管/24樣規格操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數，把剩余的板條繼續冷藏處理。分別設標準 品組（6 個濃度）、空白孔、待測樣品組。 注：為減少實驗誤差，保證準確性，建議設置復孔。
3. 加樣：依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液（空白對照孔除外）。
5. 溫育：酶標板用封板紙密封后，放入濕盒內于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標板 5 次，用吸水紙*拍干。 7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。

輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒50管/24樣規格注意事項：
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免*孔與Z后一孔間的時間間隔過大，否則將會導致不同的預孵育時間，從而影響 實驗的準確性以及重復性。
3. 孵育：嚴格按照說明書上規定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化，如果顏色較深，請提前加入終止液終止反應。
5. 建議實驗前預測樣品含量，如樣品濃度過高，應對樣品進行稀釋，計算結果時乘以相應的稀釋倍數。
6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗（即先做標準曲線，試用幾個標本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經銷商， 如果因運輸過程導致試劑盒失效，可要求調換，但概不承擔產品本身以外的任何損失。
Amersham、Serva、AppliChem等品牌，    BR，98%    131-48-6    保存：-20℃            500毫克        ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，    1克        ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，    5克        ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，中文名稱： N-乙酰-神經氨酸 其他中文名稱： 唾液酸；N-乙酰基神經氨酸；醋紐拉酸；N-乙酰甘露糖胺丙酮酸；N-乙酰涎酸；氧-唾液酸；N-乙酰-神經氨(糖)酸 英文名稱： NANA 其他英文名稱： N-Acetyl-Neuraminic；Sialic acid 產品規格： BR,98% 包裝：100毫克/500毫克/1克/5克/25克號：131-48-6C11H19NO9=309.27級別：BR含量：≥98.0%溶解性：50mg/ml,clear colorless性狀：結晶粉末。比旋光度-32° (c=2,water)。溶于水，微溶于乙醇。熔點：184-186 ℃用途：生化研究。唾液酸是廣泛存在于自然界中的碳水化合物，也是許多糖蛋白、糖肽和糖脂的基本組成部分，具有廣泛的生物功能，如血蛋白半衰期的調節、多種毒素的中和、細胞粘附、免疫的抗原抗體反應和對細胞溶解的保護。在糖蛋白或糖脂質中，由于2位的酮基形成糖苷鍵而使它位于糖側鏈的非還原性末端，其陰電荷或*的化學結構使其具有各種生理HPLC≥98%，20mg/vial    23513-15-7    10-姜酮醇    10- Jiang Tongchun
HPLC≥98%,20mg/vial    23513-08-8    8-姜辣醇    8- ginger?spicy alcohol
HPLC≥98%，20mg/vial    23513-14-6    6-姜酚    6-?Gingerol
HPLC≥98%，20mg/vial    20831-76-9    龍膽苦苷    Gentiopicroside
HPLC≥98%，20mg/vial    529-59-9    染料木苷    Genistein
HPLC≥98%，20mg/vial    446-72-0    金雀異黃酮    Genistein
HPLC≥98%，20mg/vial    27741-01-1    京尼平苷酸    Geniposidic acid
輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒50管/24樣規格HPLC≥98%，20mg/vial    24512-63-8    京尼平甙    Geniposide
HPLC≥98%，20mg/vial    6902-77-8    京尼平    Genipin
HPLC≥98%，20mg/vial    3371-27-5    (-)-倍兒茶酸    (-)?-?time of?tea?acid
HPLC≥98%，20mg/vial    62499-27-8    *    Gastrodin