購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的產品名稱、種屬、貨號、數量、協商細胞價格并預約發貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。產品僅用于科研

培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養至少15小時。

 HCⅡ 犬肝素輔因子Ⅱ 規格： 48T/96

 FSH 犬促卵泡素 規格： 48T/96T

 LH 犬促黃體生成激素 規格： 48T/96T

 E 犬雌激素 規格： 48T/96T

 E2 犬雌二醇 規格： 48T/96T

 CD8 犬白細胞分化抗原8 規格： 48T/96T

 CD6 犬白細胞分化抗原6 規格： 48T/96T

 IL-6 犬白介素6 規格： 48T/96T

 IL-4 犬白介素4 規格： 48T/96T

 IL-2 犬白介素2 規格： 48T/96T

 IL-18 犬白介素18 規格： 48T/96T

 IFN-γ 犬γ干擾素 規格： 48T/96T

 GABA 犬γ氨基丁酸 規格： 48T/96T

 β-EP 犬β內啡肽 規格： 48T/96T

 IFN-α 犬α干擾素 規格： 48T/96T

 5-HT 犬5羥色胺 規格： 48T/96T

EHA101 電擊感受態細胞 50ul*50 2,3-DPG 犬2,3-二磷酸甘油酸 規格： 48T/96T

 AE 禽腦脊髓炎 規格： 4

shēng huà shì jì L-正* 容量： 1公斤

shēng huà shì jì L-正* 容量： 1公斤

shēng huà shì jì L-異*甲酯鹽酸鹽 容量： 100克

shēng huà shì jì L-異亮氨醇 容量： 500克

shēng huà shì jì L-*甲酯鹽酸鹽 容量： RT，避光 25克

shēng huà shì jì L-纈氨醇 容量： 100克

shēng huà shì jì L-天*鈉鹽 容量： 25克

shēng huà shì jì L-天*鉀 容量： RT 25克

shēng huà shì jì L-天*鈣 容量： 100克

shēng huà shì jì L-天冬酰胺 容量： 10克

shēng huà shì jì L-天冬氨酸鎂 容量： 100克

shēng huà shì jì L-天冬氨酸二甲酯鹽酸鹽 容量： 100克

shēng huà shì jì L-天冬氨酸-β-甲酯鹽酸鹽 容量： 1公斤

shēng huà shì jì L-天冬氨酸 容量： RT 5克

shēng huà shì jì L-*甲酯鹽酸鹽 容量： 1公斤

shēng huà shì jì L-蘇氨醇 容量： RT 25克

shēng huà shì jì L-*甲酯鹽酸鹽 容量： 1公斤

shēng huà shì jì L-鼠李糖 容量： 500克

注意事項:

1. 產品僅用于科研感受態細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態細胞為例。
2．待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態細胞能夠被1         ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養45分鐘使菌體復蘇
 5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12-16小時。