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OrigamiB(DE3)pLysS 感受態細胞 100ul*50-生
OrigamiB(DE3)pLysS 感受態細胞 100ul*10-生
OrigamiB(DE3) 感受態細胞 100ul*50-生命科學儀器
OrigamiB(DE3) 感受態細胞 100ul*10-生命科學儀器
Origami2(DE3) 感受態細胞 100ul*50-生命科學儀器
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產品名稱 | Tuner(DE3) 感受態細胞 100ul*10 |
包裝 | 100ul*10 |
分類 | 表達感受態細胞 |
培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質粒或連接產物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養至少15小時。
ICAM-1/CD54 人細胞間粘附分子1 規格: 48T/96T
CDC 人細胞分裂周期基因 規格: 48T/96T
CDC 人細胞分裂周期基因 規格: 48T/96T
CTLA-4/CD152 人細胞毒性T淋巴細胞相關抗原4 規格: 48T/96T
CagA 人細胞毒素相關蛋白A 規格: 48T/96T
CTX 人細胞毒素 規格: 48T/96T
IAP 人細胞凋亡抑制因子 規格: 48T/96T
SLE 人系統性紅斑狼瘡 規格: 48T/96T
HEV-IgM 人戊型肝炎病毒IgM 規格: 48T/96T
HEV-IgG 人戊型肝炎病毒IgG 規格: 48T/96T
Pentosidine 人戊糖素 規格: 48T/96T
ACO-2 人烏頭酸酶2 規格: 48T/96T
GM 人胃粘液素 規格: 48T/96T
GIP 人胃抑素 規格: 48T/96T
GCA 人胃泌素細胞抗體 規格: 48T/96T
ProGRP 人胃泌素釋放肽前體 規格: 48T/96T
GRP 人胃泌素釋放多肽 規格: 48T/96T
Gastrin 人胃泌素 規格: 48T/96T
MTL 人胃動素 規格: 48T/96T
PG-C 人*原C 規格: 48T/96T
PG-A 人*原A 規格: 48T/96T
Pepsin 人* 規格: 4
shēng huà shì jì 氯化鈷 容量: 25克
shēng huà shì jì 氯化鉻 容量: 1公斤
shēng huà shì jì 氯化鎘 容量: 500毫克
Tuner(DE3) 感受態細胞 100ul*10shēng huà shì jì 氯化鈣 容量: 500克
shēng huà shì jì 氯化鉍 容量: 100克
shēng huà shì jì 氯代十六烷 容量: 保存:-20℃ 250毫克
shēng huà shì jì 氯代磺酚C 容量: 500克
shēng huà shì jì 氯代癸烷 容量: 保存:-20℃ 1克
shēng huà shì jì 氯測試盒(帶標準) 容量: 10個
shēng huà shì jì 氯鉑酸鉀 容量: 保存:-20℃ 100毫克
shēng huà shì jì 氯鉑酸銨 容量: RT 25克
shēng huà shì jì 氯鉑酸 容量: RT,避光 25克
shēng huà shì jì 氯吡苯脲 容量: 100克
shēng huà shì jì 氯胺T 容量: 1克
shēng huà shì jì 綠色氧化鎳 容量: RT 5克
shēng huà shì jì 綠膿菌素測定用培養基 容量: 25克
shēng huà shì jì 綠膿菌色素測定用培養基 容量: 1米
shēng huà shì jì 鋁酸鈉 容量: 100克
shēng huà shì jì 鋁片 容量: RT 500克
shēng huà shì jì 鋁鎳合金 容量: 500克
8T/96T
注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態細胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態細胞為例。
2.待感受態細胞融化后,向感受態細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養45分鐘使菌體復蘇
5.根據實驗需求,取適量已轉化的感受態細胞,加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養,37℃培養12-16小時。
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