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OrigamiB(DE3)pLysS 感受態細胞 100ul*50-生
OrigamiB(DE3)pLysS 感受態細胞 100ul*10-生
OrigamiB(DE3) 感受態細胞 100ul*50-生命科學儀器
OrigamiB(DE3) 感受態細胞 100ul*10-生命科學儀器
Origami2(DE3) 感受態細胞 100ul*50-生命科學儀器
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產品名稱 | JM109(DE3) 感受態細胞 100ul*10 |
包裝 | 100ul*10 |
分類 | 表達感受態細胞 |
培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質?;蜻B接產物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養至少15小時。
CyPA 人嗜環蛋白/親環素A 規格: 48T/96T
CgA 人嗜鉻蛋白A 規格: 48T/96T
pRB 人視網膜母細胞瘤抑制蛋白 規格: 48T/96T
RLR 人*誘導基因/RIG-1樣受體 規格: 48T/96T
RBP-4 人*結合蛋白4 規格: 48T/96T
RBP 人*結合蛋白 規格: 48T/96T
OXR 人食欲素受體 規格: 48T/96T
OX-B 人食欲素/阿立新B 規格: 48T/96T
HGH 人生長因子 規格: 48T/96T
SS 人* 規格: 48T/96T
GAP-43 人生長相關蛋白43 規格: 48T/96T
GAP-43 人生長相關蛋白43 規格: 48T/96T
JM109(DE3) 感受態細胞 100ul*10 GH-RF 人生長激素釋放因子 規格: 48T/96T
GHRP-Ghrelin 人生長激素釋放肽ghrelin 規格: 48T/96T
GHRP 人生長激素釋放多肽 規格: 48T/96T
GHBP 人生長激素結合蛋白 規格: 48T/96T
GROγ/CXCL3/MGSA 人生長調節致癌基因γ 規格: 48T/96T
GROβ/CXCL2/MGSA 人生長調節致癌基因β 規格: 48T/96T
GROα/CXCL1/MGSA 人生長調節致癌基因α 規格: 48T/96T
GTE-AGE 人腎小球組織糖基化終末產物 規格: 48T/96T
GTE-AGE 人腎小球組織糖基化終末產物 規格: 48T/96T
Kim-1 人腎損傷分子1 規格: 48T/96T
Renin 人腎素 規格: 48T/96T
ADM 人腎上腺髓質素 規格: 48T/96T
ADRA1A 人腎上腺素能a1A受體 規格: 48T/96T
ADRA1A 人腎上腺素能a1A受體 規格:
shēng huà shì jì 鄰乙氧基苯甲酸 容量: RT 25克
shēng huà shì jì 鄰硝基* 容量: 500ku
shēng huà shì jì 鄰硝基苯胺 容量: 125ku
shēng huà shì jì 鄰硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷 容量: RT,避光 10克
shēng huà shì jì 鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷 容量: 100克
shēng huà shì jì 鄰硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷 容量: 100克
shēng huà shì jì 鄰硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷 容量: 1公斤
shēng huà shì jì 鄰聯茴香胺鹽酸鹽 容量: 5毫克
shēng huà shì jì 鄰聯茴香胺 容量: 2~8℃ 1毫克
shēng huà shì jì 鄰甲*絡合劑 容量: 25克
shēng huà shì jì 鄰甲* 容量: 2~8℃ 5克
shēng huà shì jì 鄰甲苯甲酸 容量: 2~8℃ 5毫克
shēng huà shì jì 鄰甲苯胺 容量: 25毫克
shēng huà shì jì 鄰菲啰啉鹽酸鹽 容量: 保存:-20℃
48T/96T
注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態細胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?;蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?;蚋咝实倪B接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態細胞為例。
2.待感受態細胞融化后,向感受態細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養45分鐘使菌體復蘇
5.根據實驗需求,取適量已轉化的感受態細胞,加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養,37℃培養12-16小時。
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