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人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA操作步驟

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更新時間:2017-06-26 15:13:40瀏覽次數(shù):154次

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適用領(lǐng)域 科研
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細(xì)胞名稱  人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA操作步驟
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 該細(xì)胞系衍生自WI-38細(xì)胞。WI-38細(xì)胞感染低滴度的SV40病毒,經(jīng)過連續(xù)傳代、克隆選擇獲得多株亞系,其中2RA亞系含有SV40 neo (T)和轉(zhuǎn)移抗原,從而改變其有限細(xì)胞系的特性,可在常規(guī)條件下連續(xù)傳代。該細(xì)胞系的實驗操作甚少在生物安全P2級條件下進行。

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS

傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況 C265

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 陰性

STR STR鑒定

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類

產(chǎn)品名稱

人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA操作步驟

生長特性

貼壁生長

發(fā)貨地

上海

人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA操作步驟的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA操作步驟復(fù)蘇操作要點: 
1
)將培養(yǎng)基在37水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 
2
)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。 
3
)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 
4
800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 
5
)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 
6
)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
人支氣管平滑肌細(xì)胞總RNAHBSMC tRNA

小鼠雪旺細(xì)胞(MSC)(5×105)

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO 1beta9,12.5 Clone 36

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1) 小鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

GC-1, 鼠精原細(xì)胞 Mouse

PGC Others Human PGC / Gastricsin / Pepsinogen-C 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
FST Others Human FST / Follistatin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA-GP

NCI-H524 人小細(xì)胞肺癌

mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞

人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs)

人肺成纖維細(xì)胞;HFL1 人淋巴成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA-GP

MAX Others Human MAX / MYC 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CL-0293MuM-2B(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

293A,人胚腎上皮細(xì)胞系(腺病毒包裝級別) 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(前脂肪)3T3L1細(xì)胞 Hs 683(人腦視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)

人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;MuM-2B

CADM1 Others Human CADM1 / IGSF4A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISAKit  進口分裝  鹽酸甜菜堿    A0136  590-46-5    HPLC98%  20mg/

大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISAKit  進口分裝  人參皂苷Rg3    A0239  14197-60-5    HPLC98%  20mg/

大鼠6前列腺素(6-K-PG)ELISAKit  進口分裝  去氫鉤藤堿    A0341  630-94-4    HPLC98%  20mg/

大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISAKit  進口分裝  利卡靈-B;利卡靈B    A0444  51020-87-2    HPLC98%  20mg/
木瓜蛋白酶大豆胨  進口分裝  土荊皮  標(biāo)準(zhǔn)品別名:  土槿皮  英文名稱:  pseudolaric acid A  編號:  82508-32-5

大豆蛋白胨進口分裝  白花前胡素標(biāo)準(zhǔn)品別名:    英文名稱:  Praeruptorin E  編號:  78478-28-1

大豆粉木瓜酶消化物USP  進口分裝  三七皂苷Fe  標(biāo)準(zhǔn)品別名:    英文名稱:  Notoginseng triterpenes  編號:  88105-29-7

酵母提取物  進口分裝  柯諾辛  標(biāo)準(zhǔn)品別名:  柯諾辛堿  英文名稱:  Corynoxine  編號:  6877-32-3
人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA操作步驟LEB肉湯  進口分裝  Azospirillum brasilense巴西固氮螺菌

乳酸桿菌糖發(fā)酵培養(yǎng)基  進口分裝  蘇云金芽胞桿菌柏氏變種 Bacillus thuringiensis var. berliner

厭氧肉肝湯培養(yǎng)基  進口分裝  谷酸棒桿菌 Coryacterium glutamicum

沙門氏菌成套生化鑒定管9*2/*5盒用于沙門氏菌的生化鑒定  進口分裝  細(xì)黃鏈霉菌 Streptomyces microflavus

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