細(xì)胞名稱   Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胃癌細(xì)胞；MKN-45-Cas9-526實(shí)驗(yàn)方法
形態(tài)特性 圓形

生長特性 貼壁生長

特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使MKN45細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 20%FBS；400ug/ml G418

傳代方法 建議初始濃度2.0×105 cells/ml，1:3傳代；4~5天１次。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：12,12；D12S391：26,26；D13S317：8,11；D16S539：10,10；D18S51：16,16；D19S433：14,16.2；D21S11：31,31；D2S1338：18,18；D3S1358：15,16；D5S818：10,11；D6S1043：14,14；D7S820：10,11；D8S1179：13,17；FGA：19,24；Penta E：10,10；TH01：7,7；TPOX：8,8；vWA：19,19；

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胃癌細(xì)胞；MKN-45-Cas9-526實(shí)驗(yàn)方法現(xiàn)貨直銷，免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胃癌細(xì)胞；MKN-45-Cas9-526實(shí)驗(yàn)方法細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍？
取出冷凍管后， 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍， 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)， 必須注意安全， 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí)， 是否應(yīng)馬上去除DMSO？
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細(xì)胞外， 絕大部分細(xì)胞株（包括懸浮性細(xì)胞）， 在解凍之后， 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中， 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基， 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基， 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)， 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源， 所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生*的影響。來自不同物種的血清， 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胃癌細(xì)胞；MKN-45-Cas9-526實(shí)驗(yàn)方法操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

TRIB2 Others Human 人 TRIB2 / TRB2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

小鼠成肌細(xì)胞;C2C12

Lec1細(xì)胞，卵巢細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞,FL62891細(xì)胞 CL-0152MDA-MB-453(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1

POSTN Others Human 人 OSF2 / POSTN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
EFNB1 Others Rat 大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CL-0386MPC-11(小鼠漿細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2

小鼠氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

EJ人膀胱癌細(xì)胞 Human bladder cancer cell line EJ 1640+10% FBS

IL36B Protein Mouse 重組小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白

NCI-H23(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(單核細(xì)胞白血病)
CL-0386MPC-11(小鼠漿細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2

EFNB1 Others Rat 大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

小鼠氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

EJ人膀胱癌細(xì)胞 Human bladder cancer cell line EJ 1640+10% FBS

IL36B Protein Mouse 重組小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白

NCI-H23(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(單核細(xì)胞白血病)
乙酸-1-萘酯(>98%,BR)  進(jìn)口分裝  膠質(zhì)瘤組織細(xì)胞

鄰乙氧基苯甲醛(>98%,BR)  進(jìn)口分裝  腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

對甲氧基苯乙(>98%,BR)  進(jìn)口分裝  小管上皮細(xì)胞

6-甲基(>98%，BR)  進(jìn)口分裝  腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
溴化十六烷基*胺瓊脂培養(yǎng)基(05藥典)  進(jìn)口分裝  鈣蛋白酶抑制劑I(進(jìn)口)  Calpain Inhibitor I(ALLN)   號：  110044-82-1  質(zhì)量規(guī)格：  ≥95%,美國進(jìn)口

GetrimideAgarMedium  進(jìn)口分裝  DL-丙酰-DL-丙酸  DL-Ala-DL-Ala  號：  2867-20-1  質(zhì)量規(guī)格：  0.97

抗生素檢定培養(yǎng)基1號（高PH）(05藥典)  進(jìn)口分裝  DL-丙酰-DL-正纈酸  DL-Alanyl-DL-norvaline  號：  2325-18-0  質(zhì)量規(guī)格：  0.99

AntibioticAgar  進(jìn)口分裝  D-4-溴苯丙酸  4-Bromo-D-Phe-OH  號：  62561-74-4  質(zhì)量規(guī)格：  0.98
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胃癌細(xì)胞；MKN-45-Cas9-526實(shí)驗(yàn)方法TryptoseSoyaAgar  進(jìn)口分裝  BOC-L-絲酸甲酯  Boc-Ser-OMe  號：  2766-43-0  質(zhì)量規(guī)格：  BR

沙門、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基(SS)  進(jìn)口分裝  芴甲氧羰基-L-天冬酸-1-叔丁酯  Fmoc-Asp(OH)-OtBu  號：  129460-09-9  質(zhì)量規(guī)格：  >98.5%,BR

抑菌劑效力檢查培養(yǎng)基  進(jìn)口分裝  固深紅 GBC  Fast Garnet GBC Salt  號：  101-89-3  質(zhì)量規(guī)格：  BS,90%

PPLO肉湯  進(jìn)口分裝  曲利苯藍(lán)  Trypan Blue  號：  72-57-1  質(zhì)量規(guī)格：  BS

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