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目前, 生物反應器培養體系已成功應用于某些細胞凋亡檢測群(如造血干細胞、間充質干細胞、多能干細胞等)的分離和培養。
1.造血干細胞(haematopoietic stem cell, HSC)
造血干細胞(HSC)是原始的造血細胞, 是體內各種血細胞的*來源。1973年, Dexter等在體外成功分離培養出小鼠造血干/祖細胞。1980年, 人造血干細胞也被成功分離。之后HSC便成為干細胞領域的研究熱點, 但自始至終卻一直不能突破分離得到的HSCs量少的難題。直至20世紀90年代, 攪動懸浮培養(stirred suspension cultures)造血干細胞體系逐漸被提出, 在一定程度上提高了分離造血干細胞的效率。雖然分離HSCs的效率有所提高, 但是HSCs的體外擴大培養仍不能很好地得到改善。之后, 隨著各種科學技術的不斷發展和研究者的不斷探索, 3D培養系統—灌注生物反應器(perfusion reactors)逐漸發展起來。相比于傳統的靜態培養, 灌注培養的HSC的擴增率能提高10~20倍。近有人報道, HSC在攪動或旋轉的生物反應器(stirred or rotating wall vessels)中培養200 h后, 細胞數量增加高達 400倍, 且CD34+的造血干細胞量增加了30倍。
2.間充質干細胞(mesenchymal stem cell, MSC)
間充質干細胞(MSC)是典型的貼壁依賴型細胞, 以單層細胞生長在培養皿中。但是, 2003年, Baksh 研究小組發現, 在細胞因子的作用下, MSCs能以單細胞的形式在攪動懸浮生物反應器中生長和擴增, 通過RT-PCR和流式細胞檢測, 發現MSCs仍然保持其干性特征和多系分化潛能。之后, 許多研究表明, 微載體更有助于MSCs的攪動懸浮培養。Frauenschuh等利用微載體(Cytodex 1)懸浮培養豬 MSCs, 結果發現,Cytodex 1能夠促進MSCs的生長, 且能維持其向成骨細胞和軟骨細胞的分化潛能。隨后又相繼出現了大鼠骨髓MSCs、山羊MSCs、人胎盤MSCs等在微載體下利用生物反應器進行懸浮培養的報道。至此, *打破了MSCs只能進行貼壁培養的觀點。近, 一種新的灌注系統(激流式灌注系統)也被成功應用于人MSCs的培養, 并且MSCs能更好地保持向成骨細胞方向分化的多能分化潛能。這種灌注培養系統可實現激流系統和灌注系統的循環, 灌注系統保證培養液供給, 提供細胞凋亡檢測正常生長代謝所需的養分, 同時帶走代謝產物; 此外, 還利用激流式生物反應器的拖帶式傳氣技術在線監控溶氧、pH、溫度等培養條件, 隨時為細胞生長創造培養環境, 同時此系統也可單獨進行懸浮細胞的培養。所以, 目前可以成功應用生物反應器進行MSCs的培養和定向分化, 在組織工程中具有極大的實際應用潛能。
硫化鋅 25克 *
硫化銅 25克 RT 進口/國產
硫化鉛 100克 *
硫化鈉 25克 *
硫化鎘 10克 RT 進口/國產
硫代乙酰胺 100克 進口/國產
硫代氧化型輔酶I 25克 *
硫代硫酸鉀 500克 RT 進口/國產
硫代氨基脲 25克 *
磷脂酰乙醇胺 500克 *
細胞凋亡檢測
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