細胞凋亡檢測是組成間質(zhì)和上皮–血管中基質(zhì)的不溶性結(jié)構(gòu)成分。它不僅是細胞的機械支持結(jié)構(gòu), 也是供給營養(yǎng)和免疫應(yīng)答的場所。ECM參與調(diào)節(jié)胚胎發(fā)育進程, 決定細胞的黏附與遷移, 在創(chuàng)傷修復(fù)和纖維化、細胞的生長、增殖、分化、代謝和腫瘤發(fā)生及轉(zhuǎn)移中均起著重要作用。作為MSCs微環(huán)境的一個重要組成部分, 研究發(fā)現(xiàn)在纖維黏連蛋白鋪層的培養(yǎng)皿中擴增的MSCs, 可以更好地維持多向分化能力。近, 陳曉東課題組建立了一種采用MSCs細胞外基質(zhì)鋪層培養(yǎng)骨髓MSCs的方法, 該培養(yǎng)技術(shù)系統(tǒng)模擬了MSCs的胞外基質(zhì)成分, 同時還可能保留了生長因子等活性成分, 可使干細胞的擴增效率得到明顯提高。這一培養(yǎng)體系的基本操作是首先在普通培養(yǎng)皿中培養(yǎng)骨髓基質(zhì)細胞(stromal cell), 待細胞長滿后去除活細胞, 保留細胞分泌的胞外基質(zhì)成分, 隨后以此培養(yǎng)皿為載體, 進一步培養(yǎng)擴增新的 MSCs。該研究不僅證實了胞外基質(zhì)在骨髓MSCs微環(huán)境中的重要作用, 同時也為研究干細胞微環(huán)境提供了重要的體外模型。

值得指出的是, 雖然胞外基質(zhì)誘導(dǎo)MSCs增殖的方法*, 但擴增效率很不穩(wěn)定, 不同代次和狀態(tài)的細胞制備出來的細胞外基質(zhì)之間的MSCs擴增效率有較大差異, 高代次的年老細胞制備的基質(zhì)明顯不如低代次的年輕細胞。有趣的是, Chen等的工作也揭示了骨髓源ECM與其他細胞外基質(zhì)一樣也是由納米級的超細纖維構(gòu)成的這一基本事實, 如圖1所示。他們的工作提示, 基于模擬細胞凋亡檢測微環(huán)境的ECM的干細胞培養(yǎng)和擴增方法, 將為大規(guī)模擴增具高度功能性的MSCs提供新的思路并有著較高的可行性。因此, 進一步分析胞外基質(zhì)中的關(guān)鍵成分以指導(dǎo)對仿生支架材料的修飾, 進而建立規(guī)模化的干細胞培養(yǎng)和擴增的微環(huán)境十分必要。
Valproic Acid     500mg    99-66-1     丙戊酸標準品
Zolazepam Hydrochloride    500mg    33754-49-3     鹽酸唑拉西泮標準品
Methyl Linoleate     5×50mg    112-63-0     *甲酯標準品
Methyl Linolenate     5×50mg    301-00-8     亞麻酸甲酯標準品
Insulin Lispro    5.97mg    133107-64-9     賴脯胰島素標準品(2-8℃)
    5.25oz        氟化牙粉：單氟磷酸鈉(1500 ppm)/二氧化硅標準品
    5 vials    50-56-6     羥可待酮標準品
Corticotropin    5 vails    9002-60-2    促腎上腺皮質(zhì)激素標準品
    4vials    04-93-9     鹽酸*標準品
    4oz        氟化牙粉：氟化鈉/*粉標準品
    4oz        氟化牙粉：氟化亞錫-二氧化硅標準品
細胞凋亡檢測