Thymidine5ml實驗方法使用注意事項

1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。

產品名稱：Thymidine5ml實驗方法

產品簡介：

胸苷是一種嘧啶脫氧核糖核苷酸，經過連續的磷酸化形成可用于合成DNA脫氧胸腺嘧啶核苷三磷酸。

Thymidine是采用優質試劑原料配置，用于生物學相關實驗。

Thymidine5ml實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm，發射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Thymidine5ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
蓮 Nelumbo nucifera Gaertn Neferine 甲基蓮心堿 2292-16-2 C38H44N2O6 ≥98%

紫蘇醇PerillaAlcohol236-29-420mg

金銀忍冬Lonicera maackii 2,3,2",3"-Tetraxy7noochnaflavone 2,3,2",3"-四輕金連木黃同 678138-59-5 C30H22O10 膽石酸(100127

含量測定*100305-201003常溫，避光100mg

nitnofurazone *標準品59-87-0 200mg
(+)-兒 (+)-Catechin hydrate (≥98%,HPLC) 225937-10-0 20MG 標準品

土瓜狼毒Euphorbia prolifera 黏黴同 508-09-8 C30H48O ≥95% 訶子酸0 85

對照品*100350-200501HPLC法含量測定

Perpxen*標準品58-39-9 200mg*標準品

苦參Sophra　flavescens　Ait Caulophylline N-甲基野靛堿 486-86-2 C12H16N2O ≥98%
66258-76-2 *標準品 350mg

棕矢車菊速JaceosidinHPLC≥98%,20mg/支;

Polygonal (3R,4AS,8AS)-3-輕基-5,5,8A-*基-3,4,4A,6,7,8-六輕奈-2-甲全 72537-20-3

 te (AS)碳酸標準品546-93-0 2g碳酸標準品

低聚果糖-蔗果三糖;純品型;標準品;有證 470-69-9 20mg 訂購|咨詢
Lyso-PAF C-16-d4 （100 ug）     1-O-hexadecyl-（7，7，8，8-d4）-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine； Lyso-Plaet-activating Factor C-16-d4； Lyso-PAF C-16-d4

UNC3230 （1 mg）     5-[（cyclohexylcarbonyl）amino]-2-（pxenylamino）-4-thiazolecarboxamide

RPE-標記鏈霉親和素偶聯物 1 mg/ml     RPE-streptavidin conjugate 1 mg/ml

CAY10679 （10 mg）     1，1’-（1，8-dioxo-1，8-octanediyl）bis[glycyl-glycine； N，N’-bis（glycyl-glycine）-hexane-1，6-Dicarboxyamide； CAY10679

Linoleic Acid （1 g）     9Z，12Z-octadecadienoic acid； fairic Acid； Linoleic Acid

2-4（4-metxylpxenyl）-1，2-benzisothiazol-3（2H）-one     Jumonji HDM Inhibitor， PBIT
Gliadin (43-49)(Gliadorphin) AlphaTyr-Pro-Gln-Pro-Gln-Pro-Phe

W-K-Y-M-V-M-NH2Trp-Lys-Tyr-Met-Val-Met-NH2

[Leu144, Arg147]-PLP (139-151), [L144, R147-PLP(139-151)]His-Ser-Leu-Gly-Lys-Leu-Leu-Gly-Arg-Pro-Asp-Lys-Phe

Biotin-[Gln1]-Gastrin I (human)Biotin-Gln-Gly-Pro-Trp-Leu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Ala-Tyr-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2

Obestatin, rat, mousePhe-Asn-Ala-Pro-Phe-Asp-Val-Gly-Ile-Lys-Leu-Ser-Gly-Ala-Gln-Tyr-Gln-Gln-His-Gly-Arg-Ala-Leu-NH2
Thymidine5ml實驗方法二正丙胺DipropylamineCP250mL

CA1371-5g牛血清白蛋白(全組分)9048-46-85g0

ER0711Van91 I400 units

Plasmid Maxi Kit10T

Inositol100