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JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒50T售后服務儲存條件:JC-1-20℃避光保存,避免反復凍融。孵育緩沖液2-8℃保存。
有效期: 一年。
產品簡介:
線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件。JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位(mitochondrialmembranepotential)△Ψm的理想熒光探針。可以檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時,JC-1聚集在線粒體的基質中,形成聚合物,488nm激發時的大發射波長為590nm,可以產生紅色熒光,在流式圖上表現為FL1和FL2雙陽性;在線粒體膜電位較低時,JC-1不能聚集在線粒體的基質中,此時JC-1為單體,488nm激發時大發射波長為527nm,可以產生綠色熒光,形成流式圖中所有細胞FL1均為陽性。凋亡細胞則大多為FL1單陽性。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。通過JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉變可以很容易地檢測到細胞膜電位的下降,同時也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉變作為細胞凋亡早期的一個檢測指標。
線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)可以快速靈敏地檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位變化,可以用于早期的細胞凋亡檢測。試劑盒染料與其他的陽離子染料如DiOC6(3)和羅丹明123相比,特異性更高,對線粒體膜電位變化的特異性高于質膜電位變化,對線粒體去極化檢測的檢測*性更好;紅綠色熒光強度比率只受線粒體膜電位的變化,不受線粒體大小,形狀,密度的差異干擾;檢測靈敏度強,對細胞應激反應的微小異質性都能辨別;
JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒50T售后服務實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒50T售后服務注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
芒果 Mangifera indica Linn. Neomangiferin 新芒果苷 64809-67-2 C25H28O16 ≥98%
正丁胺Butylcminq109-73-90.2ml
毛喉蕊花Coleus forskohlii 2α,3α,24-Trixy7noxyolean-12-en-28-oic acid 2alpha,3alpha,24-三輕基-12-烯-28-* 150821-16-2 C30H48O5 單元素銅溶液成分分析標準物質080605
中藥對照藥材矮地茶121213-0101TLC法鑒別
Asarone*純度:≥98%
(R型)原人參三醇標... Protopanaxtriol (≥98%,HPLC) Null 20MG 標準品
花椒Zanthoxylum bungeanum 7-甲氧基-5-本并呋喃 831222-78-7 C10H10O3 ≥95% 單水合乳糖醇(L0129000
Saikosaponin C柴胡皂苷C20736-08-720mg/支
Dexametxasone Acetate皮炎平標準品1177-87-3200mg
番紅花 Crocus sativus L. Crocin II 西紅花苷Ⅱ 55750-84-0 C38H54O19 ≥98%
黃連 Chinese goldthread (-)-Stulopine 四氫黃連堿 4312-32-7 C19H17NO4 ≥98%
紫云英苷cstrcgclinHPLC≥98%;20mg/支
貝母素甲;貝母甲素 Peimine 23496-41-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材龜甲(腹甲)121494-200401TLC法鑒別
STIGMASTEROL 豆甾醇純度:>95%
2-Arachidonoyl Glycerol-d5 (100 ug) 5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid, 2-glycerol-1,1,2,3,3-d5 ester; 2-AG-d5; 2-Arachidonoyl Glycerol-d5
3,4,6-Tri-O-benzyl-β-D-Mannopyranose 1,2-(metxyl orthoacetate) (250 mg) 1,2-O-(1-metxoxyetxylidene)-3,4,6-tris-O-(pxenylmetxyl)-β-D-mannopyranose
mFluor Violet 540-標記鏈霉親和素偶聯物 1 mg/ml mFluor Violet 540-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Resolvin D2 metxyl ester (25 ug) 7S,16R,17S-trixy7noxy-4Z,8E,10Z,12E,14E,19Z-docosahexaenoic acid metxyl ester; RvD2 metxyl ester|7(S),16(R),17(S)-Resolvin D2 metxyl ester; Resolvin D2 metxyl ester
Linoelaidic Acid (250 mg) 9E,12E-octadecadienoic acid; Linoelaidic Acid
2-nitno-5-thiobenzoic acid TNB
Glucagon-Like Peptide 1, (GLP-1) amide, humanHis-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-NH2
Z-Pro-D-LeuZ-Pro-D-Leu
[Lys1015,1024]-Thrombospondin-1 (1015-1024) (human, bovine, mouse)Lys-Arg-Phe-Tyr-Val-Val-Met-Trp-Lys-Lys
Biotin-Calcitonin (salmon I)Biotin-Cys-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro-NH2 (Disulfide bridge:Cys1-Cys7)
Osteocalcin (7-19) (human)Gly-Ala-Pro-Val-Pro-Tyr-Pro-Asp-Pro-Leu-Glu-Pro-Arg
JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒50T售后服務乙基本etxyl-benzenAR500mL
CA1241-5g腺苷58-61-75g0
ER0361Eco72 I2000 units
RNAlocker10ml
流*10g
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