產(chǎn)品名稱：Annexin V-FITC/PI 雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)
儲(chǔ)存條件：2-8℃避光保存。*保存于-20℃避光。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一，它在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定和一些疾病發(fā)生過(guò)程等方面起著十分重要的作用。在正常細(xì)胞中，磷脂酰*（PS）只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，而在細(xì)胞凋亡早期，細(xì)胞膜中的磷脂酰*（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。在體內(nèi)，巨噬細(xì)胞可以識(shí)別翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜表面的PS從而將這些程序性死亡的細(xì)胞清除，因此凋亡過(guò)程中并不伴隨局部的炎癥反應(yīng)，而在細(xì)胞壞死的過(guò)程中則常常伴隨著炎癥反應(yīng)。AnnexinⅤ是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與細(xì)胞凋亡過(guò)程中翻轉(zhuǎn)到膜外的PS高親和力特異性結(jié)合。PS外翻發(fā)生在細(xì)胞核破裂，DNA化以及凋亡相關(guān)蛋白出現(xiàn)之前，這使得AnnexinV與PS的結(jié)合成為凋亡早期的一種重要檢測(cè)標(biāo)志事件。

Annexin V-FITC/PI 雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
Annexin V-FITC/PI 雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
Annexin V-FITC/PI 雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
睡蓮科植物蓮 (Nelumbonucifera Gaertn.)的葉、莖 N-nornuciferine N-去甲荷葉堿 4846-19-9 C18H19NO2 ≥98%

紫云英苷cstrcgclin480-10-420mg

紅椿Toona ciliate 6,9,10-Trixy7noxy-7-megastigmen-3-one 6,9,10-三輕基-7-巨豆烯-3-同 476682-97-0 C13H22O4 醋酸安奈德(100125

中藥對(duì)照藥材野木瓜121224-0301TLC法鑒別

Lignans亞麻木酚素(SDG) 純度：≥97%
100-66-3 茴香醚標(biāo)準(zhǔn)品 1.2ml×3ampules

龍血速BLoureirinB11942-90-020mg

N-p-CouMaroyl-N'-caffeoylputrescine N-對(duì)香豆酰-N'-咖非酰腐安 1138156-77-0

,四溴菊酯標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào)：  100MG

風(fēng)信子素;2-(1-Ethoxyetho 20mg 訂購(gòu)|咨詢
蓮 Nelumbo nucifera Gaertn Neferine 甲基蓮心堿 2292-16-2 C38H44N2O6 ≥98%

紫蘇醇PerillaAlcohol236-29-420mg

金銀忍冬Lonicera maackii 2,3,2",3"-Tetraxy7noochnaflavone 2,3,2",3"-四輕金連木黃同 678138-59-5 C30H22O10 膽石酸(100127

含量測(cè)定*100305-201003常溫，避光100mg

nitnofurazone *標(biāo)準(zhǔn)品59-87-0 200mg
15（S）-HEDE （250 ug）     15S-xy7noxy-11Z，13E-eicosadienoic acid； 15（S）-HEDE

α-（difluorometxyl）-DL-Arginine （25 mg）     DFMA|RMI 71897； 2-（difluorometxyl）arginine

Nuclear Red LCS1     Nuclear Red LCS1

Tricosanoyl Ethanolamide （50 mg）     N-（2-xy7noxyetxyl）-tricos*； Tricosanoyl Ethanolamide

5（Z），8（Z），11（Z）-Eicosatrienoic Acid Ethanolamide （5 mg）     N-（2-xy7noxyetxyl）-5Z，8Z，11Z-eicosatrienamide； Mead Acid Ethanolamide； 5（Z），8（Z），11（Z）-Eicosatrienoic Acid Ethanolamide

1-     Dantrolene wo7ium
gp100 (639-647)Arg-Leu-Pro-Arg-Ile-Phe-Cys-Ser-Cys

α-Defensin-1, humanAsp-His-Tyr-Asn-Cys-Val-Ser-Ser-Gly-Gly-Gln-Cys-Leu-Tyr-Ser-Ala-Cys-Pro-Ile-Phe-Thr-Lys-Ile-Gln-Gly-Thr-Cys-Tyr-Arg-Gly-Lys-Ala-Lys-Cys-Cys-Lys (Disulfide bridge: Cys5- Cys34, Cys12-Cys27, Cys17-Cys35)

[Nle11] Substance PArg-Pro-Lys-Pro-Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu-Nle-NH2

Biotin-Neurokinin ABiotin -His-Lys-Thr-Asp-Ser-Phe-Val-Gly-Leu-Met-NH2

p60c-src Substrate ITyr-Ile-Tyr-Gly-Ser-Phe-Lys
Annexin V-FITC/PI 雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)過(guò)氧化十二酰Dilauroyl peroxide98%

CU11611-100mgUDPG/*核苷-5''-二磷酸葡萄糖28053-08-9100mg0

A1653-25MGAlbumin Human Serum (Fraction V) 人血清蛋白70024-90-725mg

Yeast Plasmid Kit100T

*1g