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Caspase 8 活性檢測試劑盒20T

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更新時間:2017-07-03 14:02:44瀏覽次數:266次

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Caspase 8 活性檢測試劑盒20T公司供應的細胞生物學試劑品種齊全,質量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購!

 

Caspase 8 活性檢測試劑盒20T儲存條件:裂解緩沖液和檢測液室溫保存;其他-20℃避光保存。

有效期:一年。

產品簡介:

Caspase8活性檢測試劑盒(Caspase8ActivityAssayKit)是采用分光光度法檢測細胞或組織裂解液中Caspase8酶活性或純化的Caspase8酶活性的試劑盒。Caspase(Cysteine-requiringAspartateProtease)是一個在細胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase8被認為是細胞凋亡信號轉導過程中比較上游的一個caspase。在Fas-receptorTNFR-1介導的細胞凋亡過程中caspase8被激活,形成一個由p18p10組成的二聚體,進一步激活下游的caspase4caspase6caspase9caspase10.Caspase8活性檢測試劑盒是基于casepase8可以催化底物Ac-IETD-pNA產生黃色的pNApNA405nm附近有強吸收,從而可以通過測定吸光度來檢測caspase3的活性。本試劑盒用酶標儀檢測或容量不超過100μl的分光光度檢測杯檢測,可用于培養細胞或新鮮組織樣本的caspase-8檢測。

Caspase 8 活性檢測試劑盒20T實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
Caspase 8 活性檢測試劑盒20T注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
潺槁木姜子Litsea glutinosa Reticuline 牛心果鹼 485-19-8 C19H23NO4 97%

膽紅速Bilirubin20mg/

RS表告依春 RSepigoitrin 1072-93-1 20mg HPLC98% 用于含量測定

中藥對照藥材玉竹121467-200401TLC法鑒別

AlisolB-23-acetate澤瀉醇B-23-醋酸酯純度:≥97%
142-82-5 庚烷標準品 5ml

硫秋水仙苷Thiocolchicoside60-41-220mg

Taxifolin 3-O-xyloside 紫杉葉素 3-O-BETA-D-木糖苷 40672-47-7

*相關化合物 A標準品137862-87-4 10mg*相關化合物 A標準品

橄欖苦苷;Oleuropein 32619-42-4 20mg 訂購|咨詢
7084-24-4 矢車菊素-3-O-葡標準品 15mg

遠志Polygala tenuifolia Willd. 3,6'-二芥子酰基蔗糖 C36H46O17 98% 東莨菪減19090-025

Hederagenin常春藤皂苷元20mg/HPLC98%

甲磺酸奈非那韋標準品200mg甲磺酸奈非那韋標準品

厚樸酚 528-43-8 HPLC98%;20mg 訂購|咨詢
溴化四庚,英文名或英文縮寫:Tetraheptylammonium bromide,級別:4N99.8%,規格:1

6020-87-7肌酸Creatine monohydrate

偶氮二異丙基咪唑啉鹽酸鹽,英文名或英文縮寫:AIBI,級別:AR,規格:500毫克

赤芝酸E Lucidenic acid E (HPLC,98%) 98665-17-9 5MG 通用試劑

Dowex 508 離子交換樹脂 DOWqX(R) 50 8 11119-67-8
3--9-乙基咔唑shēng huà shì jì容量:10

丁二酰錄 SUCCINYL CHLORIDq 243-0-4

1,3-Benzothiazol-2-ylboronic acid 499769-96-9

芴甲氧羰酰胺 9-Fluorenylmethyl carbamate,99.0% 84418-43-9 5G 通用試劑

L-去甲/去甲/(R)-4-(2--1-羥基乙基)-12-苯二酚/L-Noradrenaline BR98% 500毫克 國產
Caspase 8 活性檢測試劑盒20T微量可調移液器P2 Gilson原裝

Gumtragacanthpowder西黃蓍膠粉5GR99.5%

多烯多安 Polyqthylqnq-polycminqs 68131-73-7

乙醛肟/亞乙基胲/Acetaldoxime BR99% 100毫升 國產/進口

反式-2-己烯酸/-2-己烯酸/(E)-2-己烯酸/2-己烯酸反式/Trans-2-Hexenoic acid BR99% 10 進分

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