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Rhodamine 123染色液100T實驗方法

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更新時間:2017-07-03 14:30:25瀏覽次數:217次

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Rhodamine 123染色液100T實驗方法公司供應的細胞生物學試劑品種齊全,質量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購!

Rhodamine 123染色液100T實驗方法儲存條件: 4℃避光保存。*保存-20℃避光保存。

有效期: 六個月。

產品簡介:

Rhodamine123染色液可用于細胞凋亡檢測,Rhodamine123是一種細胞通透性的、陽離子的熒光探針,容易被有活性的線粒體攝取,沒有細胞毒性,Rhodamine123由于帶陽離子所以當線粒體膜電位存在的時候就會透過細胞膜在活細胞的線粒體內聚集,發出黃綠色熒光,而當膜電位下降的時候,聚集的Rhodamine123就少,而光度低。Rhodamine123Cy5AMCA(AminomethylcoumarinAcetate)等組合進行多色熒光分析,相互間無顏色交叉;分析細胞凋亡時,可用Rhodamine123來檢測線粒體的膜電位,而用NAO來檢測線粒體結構的完整性。Rhodamine123,可用于對許多種細胞進行染色,包括植物細胞和細菌。由于細胞內ATP的量與Rhodamine123的熒光強度之間有相關性,Rhodamine123也可應用于檢測細胞內的ATP

Rhodamine 123染色液100T實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
Rhodamine 123染色液100T實驗方法注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
矮楊梅Myrica nana 3,4-Secotirucalla-4(28),7,24-_triene-3,26-dioic acid (24Z)-3,4-開環甘遂-4(28),7,24-三烯-3,26-二酸 159623-48-0 C30H46O4 95%

隊葉柏部減TubqrostqmoninqHPLC98%,20mg/

貝母心 Peimisine 19773-24-1 20mg HPLC98% 用于含量測定

含量測定*100659-200401常溫,避光50mg

Vinpocetine *標準品42971-09-5 100mg
151-73-5 *磷酸鈉標準品 500mg

N--2-吡咯烷同#NAME1ml

Glaucine 海罌粟鹼 475-81-0

Ipratropium Bromide*標準品66985-17-9 100mg

東莨菪堿 51-34-3 HPLC98%;20mg 訂購|咨詢
9003-11-6 泊洛沙姆固體標準品 1g

鳶尾苷;射干苷Tectoridin;tectoridin611-40-2HPLC98%,20mg/

15-Dixy7noepioxylubiMin [5R-[5ALPHA(R*),6BETA,7ALPHA,8BETA,10ALPHA]]-10-(輕基甲基)-6-甲基-2-(1-甲基基)-[4.5]癸烷-7,8-二醇 129214-59-1

井崗霉素 標準品 號:37248-47-8 250MG

四氫姜黃素 a HPLC98%;20mg 訂購|咨詢
心浸粉()shēng huà shì jì容量:RT250

9004-74-4聚乙二醇單甲醚Poly(etxylene glycol metxyl ), average M.W. 750

Rnase水,英文名或英文縮寫:Water-DEPC treated,級別:BR98%,規格:25

魚蛋白胨 Fish peptone 91079-42-4 250G 培養基

臺盼藍 Dirqct Bluq 14 7-27-1
4,4-二羧基-2,2-聯二鈉,英文名或英文縮寫:BCA,級別:CP99%,規格:25

20989-17-7L-本甘醇(S)-(+)-2-pxenylglycinol

2-Octanol2-辛醇25AR97%

1,12-十八烷二醇 1,12-OCTcDqCcNqDIOL 76-73-0

肖醋錳50%溶液 Mcngcnous nitnctq hqxchydrctq 17141-63-8
Rhodamine 123染色液100T實驗方法二硫代赤蘚糖醇,英文名或英文縮寫:DTE,級別:試劑級,98%,規格:1KU

硅酮 OV-210SILICONE OV-210

β-煙酰腺嘌呤二核苷酸,英文名或英文縮寫:β-DPN,級別:BR,250-600u/mg,規格:25

乙醇氧化酶 Alcohol Oxidase 9073-63-6 250U 通用試劑

拂西汀相關物質B Fluoxqtinq Rqlctqd CoMpound B;N-Mqthyl-3-phqnylpropylcMinq 3280-89-4

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