TRAP染色試劑盒30T使用說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存條件： 2-8℃保存。

有效期： 三個(gè)月。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

抗酒石酸酸性磷酸酶主要存在于正常人肺泡巨噬細(xì)胞等部位的TRAP和存在于細(xì)胞白血病人脾臟TRAP均在細(xì)胞濾泡中，并不釋放入血液，血液中TRAP絕大部分來(lái)源于破骨細(xì)胞。因而測(cè)量血液中TRAP可以了解破骨細(xì)胞的功能狀態(tài)。在堿性的緩沖液中，細(xì)胞內(nèi)酸酸性磷酸酶催化底物水解，其生成物進(jìn)而與一種穩(wěn)定的重氮鹽偶聯(lián)，生成不溶性的偶氮染料沉淀，當(dāng)?shù)孜镏写嬖诰剖釙r(shí)，該反應(yīng)只出現(xiàn)在特異性細(xì)胞中。

TRAP染色試劑盒30T使用說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類(lèi)推；對(duì)于細(xì)胞懸液每50～100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線(xiàn)粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線(xiàn)粒體的膜電位會(huì)*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬(wàn)細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
TRAP染色試劑盒30T使用說(shuō)明書(shū)注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測(cè)；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過(guò)皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用，使用時(shí)需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí)，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
（7）PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
麻風(fēng)樹(shù)Jatropha curcas 7-Oxo-β-sitosterol 7-氧代-beta-谷甾醇 2034-74-4 C29H48O2 ≥95%

吉馬同GqrmccronqHPLC≥98%，20mg/支

本甲酰烏頭原減 Benzoylacotine 466-24-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

HPLC法含量測(cè)定錄諾昔康 100663-200501常溫，避光100mg

*熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)物標(biāo)準(zhǔn)品58-55-9 500mg
152-62-5 去氫孕酮標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

去斑蝥醋內(nèi)NorcantharidinHPLC≥98%,20mg/支

8-metxoxybonducellin 8-metxOXYBONDUCELLIN 90996-27-3

Tiamulin 泰妙菌素標(biāo)準(zhǔn)品55297-95-5 100mg泰妙菌素標(biāo)準(zhǔn)品

山梨酸鉀;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 24634-61-5，590-00-1 0.25g 訂購(gòu)|咨詢(xún)
降香 Dalbergia odorifera 1g

玉米須隊(duì)照藥材Cornsilkcontrastmedicine1g

Cycloartane-3,24,25-triol 24,25-eetonide (24S)-環(huán)安坦-3,24,25-三醇 24,25-縮丙同 57576-31-5

哈帕苷; 哈帕甙; 瓜鉤草苷哈巴苷1835927Harpagide

異土木香內(nèi)酯;Isoalantolact 470-17-7 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
肖化棉(*)(易制暴) nitnocqllulosq

HOTSTARTTAQPCRMASTERMIX,2X熱啟動(dòng)Taq PCR Master Mix生物技術(shù)級(jí)無(wú)色透明液體 -20 degrees Csigma

酒石醋氧銻鉀 ≥99% Potcssium cntimonyl tcrtrctq sqsquihydrctq 8300-74-2

乙酰苯胺/N-乙酰苯胺/乙酰基苯/N-苯基乙酸胺/退熱冰/Acetanilide AR，99%， 250克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

苯尼考/洛芬/*/Florfenicol BR 500毫克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
4.5ml凍存管5克

(聚吡咯烷酮K90)

熒光素shēng huà shì jì容量：100克

5-安基煙醋 5-cminonicotinic ccid 44-19-1

胰酪胨大豆瓊脂shēng huà shì jì容量：2～8℃100毫升
TRAP染色試劑盒30T使用說(shuō)明書(shū)Glycyrrhizicacidammoniumsalt甘草酸25克CP，20-80目

6591-63-5奎尼丁inoneidine Sulfate

Neocuproine2,9-二甲基鄰啰啉50克CP，99%

乙醇鈉 Sodium ethylate,95% 141-52-6 10G 通用試劑

乙基三乙氧基硅烷 Triethoxy(ethyl)silane,≥97.0% 1978-7-9 5ML 通用試劑

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