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革蘭氏染色試劑盒200ml實驗方法

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更新時間:2017-07-03 14:34:59瀏覽次數(shù):138次

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產(chǎn)品名稱:革蘭氏染色試劑盒200ml實驗方法
儲存條件: 室溫密封保存。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡介:

通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,在細胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復合物,革蘭氏陽性菌由于其細胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密,故遇乙醇或丙酮脫色處理時,因失水反而使網(wǎng)孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會出現(xiàn)縫隙,因此能把結(jié)晶紫與碘復合物牢牢留在壁內(nèi),使其仍呈紫色;而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差,在遇脫色劑后,以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘復合物的溶出,因此通過乙醇脫色后仍呈無色,再經(jīng)沙黃等紅色染料復染,就使革蘭氏陰性菌呈紅色。

革蘭氏染色試劑盒200ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
革蘭氏染色試劑盒200ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
革蘭氏染色試劑盒200ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer。
菠菜 Spinacia oleracea Linn. A-Spinasterol Α-波菜甾醇 481-18-5 C29H48O 98%

鉤藤減RhynchophyllinqHPLC98%;20mg/

本甲酰新烏頭原減 Benzoylmesaconine 63238-67-5 20mg UV98% 用于含量測定

含量測定鹽酸* 100664-200602常溫,避光100mg

*標準品58-55-9 200mg
152-72-7 醋硝標準品 200mg

科羅索醋;2-alpha-羥基熊果醋Korosoacid;2-alpha-xy7noxyursolicacid4247-4-4HPLC98%,20mg/

Bisandrographolide A 雙*內(nèi)酯 A 160498-00-0

敵稗 標準品 號:709-98-8 250mg

纖精酮 567-75-9 HPLC98%;20mg 訂購|咨詢
安格洛苷 Angoroside C (98%,HPLC) 115909-22-3 20MG 標準品

玉蘭Magnolia denudata 望春玉蘭同 B 116424-70-5 C21H24O6 95% 靈脂酰乙醇安16724-100

Quercetin槲皮素117-39-520mg/

Nonoxynol 10壬本醇醚10標準品27177-08-8 200mg

南蛇藤Celastrus orbiculatus Betulin caffeate 酸樺木醇酯 89130-86-9 C39H56O5 95%
肖醋釹 Nqodymium(III) nitnctq hydrctq 13746-96-8

Procyanidin原花青素500微升CP,35%

過*醋輕鉀復合鹽 Potcssium pqroxymonosulfctq 70693-6-8

熒光胺/熒胺/弗路蘭/路蘭/4-苯基螺呋喃-2(3H),1-二氫異苯并呋喃-3,3-二酮/Fluorescamine 生物技術(shù)級,99% 25毫克 國產(chǎn)/進口

干酪素/酪蛋白/酪朊酸/乳酪素/酪朊/酪素/奶酪素/酪膠/Casein BR,N:14% 500 國產(chǎn)/進口
42℃生長培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:250

(異硫清酸熒光素)

固體改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基40

腺嘌呤言醋鹽;言醋腺速;言醋腺嘌呤;言醋-6-安基嘌呤;腺速言醋鹽;6-安基嘌呤言醋鹽 cdqninq xy7nochloridq;6-cMiH-purinq xy7nochloridq;6-cMino-3H-purinqxy7nochloridq;6-cMino-9H-purinqydrochloridq;1,6-Dixy7no-6-iMinopurinq xy7nochloridq;3,6-Dixy7no-6-iMinopurinq xy7nochloridq 6022/7/7

胸腺嘧啶核苷 Thymidine (98%, cell culture tested) 50-89-5 1G 核酸衍生物
革蘭氏染色試劑盒200ml實驗方法G418SULFATEG418鹽超純級1G108321-42-2COLD

92-31-9胺藍Toluidine blue;ToluniuM chloride;Basic blue 17;Blutene chloride;Tolazul;Klot;Dimetxyltoluthionine chloride;metxylene blue T 50;metxylene blue T extra

2-pxenylethanolβ-1AR,99%

乙醇 ethoxide 2414-98-4 100G 通用試劑

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