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堿性磷酸酶(AKP、ALP)檢測試劑盒50T實驗方法

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更新時間:2017-07-03 14:52:48瀏覽次數:380次

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堿性磷酸酶(AKPALP)檢測試劑盒50T實驗方法注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
堿性磷酸酶(AKPALP)檢測試劑盒50T實驗方法儲存條件: 2-8℃避光保存。

有效期:一年。

產品簡介:

堿性磷酸酶分解磷酸苯二鈉,產生游離酚盒磷酸,酚在堿性溶液中與4-氨基安替吡啉作用經鐵氧化生成紅色醌衍生物,根據紅色深淺可以測定酶活力的高低。

堿性磷酸酶(AKPALP)檢測試劑盒50T實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
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標準品乙酰吉它霉素130372-200301效價測定

β-Glucogallin Beta-葡糖倍苷純度:>95%
細菌蛋白胨5

1071-93-8己二酸二酰Adipic dihydrazide

3-(Tetraxy7no-2H-pyran-2-yloxy)pxenylboronic acidpinacol ester 850568-69-3

1-庚炔 1-Heptyne ,98.0% 628-71-7 5ML 表面活性劑

N-溴代丁二酰亞胺shēng huà shì jì容量:100
4-甲基-7-乙酰氧基-α-D-半乳糖苷,英文名或英文縮寫:MU-α-Gal,級別:BR98%,規格:25

60871-83-2三扶甲磺酸 TRIFLUOROmetxANESULFONATE

PUROMYCINDIxy7noCHLORIDE嘌呤霉素,2HCl超純級白色至黃白色固體FROZENsigma

,-2,4-庚二烯醛 2,4-Heptadienal,90% 4313-3-5 1G 通用試劑

磷酸烯醇酸單鉀鹽/磷酸烯醇酸單鉀鹽/磷酸烯醇酸酯一鉀/磷酸烯醇式酸單鉀鹽/PEP-K 超純,98% 250毫克 國產/進口
堿性磷酸酶(AKPALP)檢測試劑盒50T實驗方法ω-溴苯/α-溴代苯/2-溴苯/苯甲酰甲基溴/2-溴代苯/2--1-苯基/溴乙酰苯/ω-溴代苯/2-Bromoacetophenone CP 25 國產

xlonofonm:ISOAMYLALCOHOL24:1錄仿:異戊醇 24:1生物技術級透明無色溶液RTsigma

四典化鉑 PLcTINUM(IV) IODIDq 7790-46-7

一氧化氮合成酶測試盒(T-NOSiNOScNOS三型同時出結果)/NOS測試盒(T-NOSiNOScNOS三型同時出結果) 比色法 50/24

 

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