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酵母蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
酵母蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T使用說明書儲存條件: 蛋白酶抑制劑-20℃保存; 蛋白提取液室溫保存。
有效期:一年。
產品簡介:
酵母蛋白提取試劑盒適用于從各種酵母樣本中高效而溫和地抽提可溶性總蛋白。提取過程簡單方便,避免了重復性差的研磨法,超聲波法或壓榨法對酵母細胞的破壞,避免激烈的機械處理造成的氧化和熱度升高對目的蛋白的破壞作用。可在1小時內完成。
該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了。 提取的蛋白直接用于等點聚焦電泳、雙向電泳。
酵母蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
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垂盆草Sedum sarmentosum Sarmentosin 垂盆鈔草甙(治肝炎藥),垂盆草甙 71933-54-5 C11H17NO7 ≥95%
升麻速Cimifugin20mg/支
柴胡皂苷C;柴胡皂甙C Saikosaponin C 20736-08-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定*100686-200401常溫,避光100mg
*相關物質B標準品15883-20-250mg
165450-17-9 紐甜標準品 200mg
靛藍Indigo48-89-320mg
Secoisolariciresinol 開環異落葉松樹脂酚 29388-59-8
Benoxinate xy7nochloride*標準品5987-82-6200mg*標準品
* E ;cucurbitacin 18444-66-1 10mg 訂購|咨詢
結香花Edgeworthia chrysantha Lindl Tiliroside 銀鍛苷 20316-62-5 C30H26O13 ≥98%
右旋龍腦D-bornqol207-70-020mg
毛地黃素 Digitaline 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品*S130539-200301系統適應性
2,3,5,4-四羥基二本葡萄糖苷;何首烏苷 2,3,5,4-tetraxy7noxyl dipxenyletxylene-2-o-glucoside 82373-94-2 20mg HPLC≥98% 暫無簡介
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