蛋白酶抑制劑混合物（細菌蛋白提取）1ml使用說明書使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產品名稱：蛋白酶抑制劑混合物（細菌蛋白提?。?/span>1ml使用說明書
儲存條件：-20℃保存。

有效期：一年。

產品簡介：

本蛋白酶抑制劑混合物包含5種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括*蛋白酶、半*酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

此抑制劑混合物為100 倍濃縮DMSO 溶液，適用于從細菌中提取蛋白，直接加入任何類型的細菌裂解產物中，均能有效抑制蛋白酶的活性，更高效的提取目的蛋白。適用于Western Blot 和免疫共沉淀等。

蛋白酶抑制劑混合物（細菌蛋白提?。?/span>1ml使用說明書操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm，發射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
蛋白酶抑制劑混合物（細菌蛋白提?。?/span>1ml使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
五味子Schisandra chinensis (Turcz.) Baill. Schisandrin A 五味子甲素 61281-38-7 C24H32O6 ≥98%

貝母速PqimininqHPLC≥98%，20mg/支

蟾毒靈;蟾酥靈 Bufalin 465-21-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

UV含量測定托芬那酸100690-200401常溫，避光100mg

Poloxamer Solid 泊洛沙姆固體標準品9003-11-61g
1693-37-4 N-乙酰對安基酚相關雜質B標準品(NA) 30mg

黃皮Clausena lansium 雙丙同安草酸鹽 625-04-7 C6H13NO ≥95% CORYNANTHINE(RAUHIMBINE(RG0 812-025

對照品*100071-199905含量測定

Estradiol Cypionate環戊丙酸雌二醇標準品313-06-4200mg環戊丙酸雌二醇標準品

紫莖澤蘭Eupatorium adenophorum 3-Acetoxy-4,7(11)-cadinadien
姜黃 Curcuma longa L. Tetraxy7nocucumin 四氫姜黃素 36062-04-1 C21H24O6 ≥98%

柚皮速-7-O-葡萄糖醛醋苷Ncringqnin-7-O-glucuronidq20mg

馬兜鈴酸B;馬兜鈴酸II Aristolochic Acid B 313-67-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

對照品N-氧化*130522-200301系統適應性

靈芝酸D Ganoderic acid D 108340-60-9 20mg HPLC≥98% 本品用于含量測定
大鼠血管內皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

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