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更新時間:2017-07-04 14:30:21瀏覽次數(shù):140次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
產(chǎn)品名稱:蛋白酶抑制劑混合物片劑(EDTA Free)1片使用說明書
儲存條件:2-8℃保存。
有效期:兩年。
產(chǎn)品簡介:
本蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括*蛋白酶、半*酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。此抑制劑混合物適用于從哺乳動物細(xì)胞、組織中提取蛋白,直接加入任何蛋白裂解液中,均能有效抑制蛋白酶的活性,更高效的提取目的蛋白。適用于WesternBlot和免疫共沉淀等。
蛋白酶抑制劑混合物片劑(EDTA Free)1片使用說明書使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
蛋白酶抑制劑混合物片劑(EDTA Free)1片使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
蛋白酶抑制劑混合物片劑(EDTA Free)1片使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
香紫蘇 Salvia sclarea L. Sclareol 香紫蘇醇 515-03-7 C20H36O2 ≥98%
柴胡皂苷B1ScikoscponinB1HPLC≥98%,20mg/支
朝藿定A;羊霍定A Epimedin A 110623-72-8 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材母丁香121531-200501TLC法鑒別
ANDROGRAPANIN 新*內(nèi)酯苷元純度:>95%
174794-02-6 *雜質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品(-20℃,+4℃) 5mg
抗血漿鑒別試劑盒(抗人、抗馬、抗豬、抗牛PlasmaresistantidentificationKit(antipeople,antihorse,antipig,antibovine10支/套
Calycosin 毛異黃同 20575-57-9
*相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品63968-75-2 50mg
西紅柿堿 17406-45-0 HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
十五烷酸 Pentadecanoic Acid 分 子 量:242.4000 編號:1002-84-2 分子式:C15H30O2; CH3(CH2)13COOH 物理化學(xué)性質(zhì):熔點(diǎn):53℃,沸點(diǎn):339℃
柚Citrus maxima Marmin eetonide 7-[[(2E)-3-甲基-5-[(4R)-2,2,5,5-四甲基-1,3-二氧雜環(huán)-4-基]-2-烯基]氧基]-2H-1-本并-2-同 320624-68-8 C22H28O5 δ-六六六(C14074000
鑒別黃山藥皂苷提取物110891-200001常溫,避光200mg
*相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品15mg
刺桐Erythrina arborescens 1"-xy7noxyerythrinin C none 913690-46-7 C20H18O7 ≥95%
小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP3)ELISA試劑盒 ,英文名: MCP3 ELISA Kit
人細(xì)胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA檢測試劑盒HumanSurfaceMembraneImmunoglobulin,SmIgELISAKit 96T/48T
大鼠膜聯(lián)蛋白IV(ANX-IV)免疫試劑盒 Rat annexin IV,ANX-IV ELISA Kit
英文名稱RatreceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligandELISAKit大鼠核因子活化因子受體配體(RANKL)規(guī)格:96T/48T
酵母菌落直接PCR檢測試劑盒20次
ELISAKitHBF人胎兒血紅蛋白規(guī)格:48T/96T
小鼠26S蛋白酶體(26S PSM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human pepsinogen A (PG-A) ELISA Kit 人*原A(PG-A)ELISA試劑盒
HumanUltraSensitiveProstateSpecificAntigen,PSAUSELISAKit 人超敏前列腺特異性抗原(PSA-US)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanconnectivetissuegrowthfactor,CTGFELISA試劑盒人結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織CDK5/P35激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanProteinZELISAKit人蛋白Z(ProteinZ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蛋白酶抑制劑混合物片劑(EDTA Free)1片使用說明書人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗胸腺細(xì)胞球蛋白(ATG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗信號識別顆粒抗體(SRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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