產品名稱：Bradford 蛋白定量試劑盒1000T實驗方法
儲存條件：染色液2-8℃保存。蛋白標準-20℃保存。

有效期：一年。

產品簡介：

Bradford法（考馬斯亮藍法），是目前靈敏度高的蛋白質測定法之一。當Bradford染色液（考馬斯亮藍G250）和蛋白在酸性條件下結合時，溶液顏色由棕黑色轉為藍色，大吸光值波長由456nm轉至595nm，吸光值與蛋白質的含量在一定濃度范圍內有較好的線性關系，通過測定吸光值大小并對照標準蛋白的吸光值，推算出蛋白濃度，實現了蛋白濃度測定的快速，穩定和高靈敏度。Bradford染色液為2倍濃縮母液，便于儲存。

Bradford 蛋白定量試劑盒1000T實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
Bradford 蛋白定量試劑盒1000T實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm，發射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Bradford 蛋白定量試劑盒1000T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
白芷 A. dahurica (Fisch.) Benth. et Hook Scopoletin 東莨菪素 92-61-5 C10H8O4 ≥98%

刺五加苷EqlquthqrosidHPLC≥98%，20mg/支

橙皮素;5,7,3’-三輕基-4’-甲氧基黃烷同、圣草酚4’-甲基迷 Hesperitin 520-33-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

中藥對照藥材虎杖葉121534-200501TLC法鑒別

WITHANOSIDE IV 鹽酸奧克巴胺IV純度：>95%
176447-94-2 多非利特相關物質A標準品 20mg

杜虹花Callicarpa pedunculata none 1246012-25-8 C28H34O14 ≥95% 流酸長春花減 - 對照譜圖(V0 05000

肖態氮標準溶液 異斯特維醇標準品 1，1，1，2-四錄

Lorazepam Related Compound A*相關物質A標準品2848-96-6 25mg*相關物質A標準品

桑根酮D 81422-93-7 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
鹽酸去氫駱駝蓬堿 Harmine xy7nochloride 分 子 量：248.7100 編號：343-27-1 分子式：C13H13ClN2O 別　　名：鹽酸-7-甲氧基-1-甲基-9H-比啶并(3,4-B)吲哚;哈爾堿鹽酸鹽;鹽酸哈爾明 藥理藥效：殺菌、止癢，抗銀屑病作用，抗作用。

油橄欖樹 Olea europaea L. Oleuropein 橄欖苦苷 32619-42-4 C25H32O13 異阿魏酸; -輕基-4-甲氧基肉桂酸(55 9

含量測定甘油三油酸酯111692-200501-20℃，避光0.15ml

Homatropine metxylbromide甲溴后馬托品標準品80-49-9 250mg

三尖杉 Cephalotaxus fortunei P.E. Homoharringtonine * 26833-87-4 C29H39NO9 ≥98%
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