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我司Lowry 蛋白定量試劑盒1000T實驗方法本著標準*、質量*、服務*、信譽*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網上采購模式!我們將竭誠為您服務,咨詢!
Lowry 蛋白定量試劑盒1000T實驗方法儲存條件:試劑AB 和Folin-Ciocalteu 試劑4℃保存。蛋白標準-20°C 保存。
有效期:一年。
產品簡介:
在堿性條件下,蛋白質中的肽鍵與銅結合生成復合物,Folin—酚試劑中的磷鉬酸鹽—磷鎢酸鹽被復合物蛋白質中的*和苯*殘基還原,產生深藍色,在一定的條件下,藍色深度與蛋白的量成正比,可根據750nm的光吸收值大小計算蛋白質的含量。
Lowry 蛋白定量試劑盒1000T實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
Lowry 蛋白定量試劑盒1000T實驗方法注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
黃花香茶菜Isodon sculponeata Sculponeatin A 黃花香茶菜甲素,黃花甲素,大萼變型甲素 85287-60-1 C20H24O6 ≥97%
人參二醇PcncxcdiolHPLC≥98%,20mg/支
川芎嗪;* Chuanxiongzine 1124-11-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材人工虎骨121536-200501TLC法鑒別
TRIGONELLINE xy7noCHLORIDE 鹽酸胡蘆巴堿純度:>95%
177530-93-7 外消旋依法韋侖標準品 20mg
醋醋*TriamcinolonePuRuilin15mg/支
3(20)-Phytene-1,2-diol 438536-34-6
Lutein 葉黃素標準品1ml
竹節參皂苷ⅣA 51415-02-2 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
知母Anemarrhena asphodeloides Bge. Timosaponin A1 知母皂苷A1 68422-00-4 C33H54O8 ≥98%
油醋Olqicccid11-80-120mg
毛萼結晶甲 Maoecrystal A 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
檢查用S-*100894-200701常溫,避光30mg
3,4,5-三酰奎寧酸 3,4,5-Tricaffeoylinoneic acid 86632-03-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
大鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)免疫試劑盒 Human ICAM-3 ELISA Kit
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Ratovariancancermarker-CA125ELISA試劑盒大鼠卵巢癌標志物CA125ELISA試劑盒規格:96T/48T
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Humanmatrixextracellularphosphoglycoprotein,MEPEELISAKit人細胞外基質磷酸糖蛋白(MEPE)ELISA試劑盒規格:96T/48T
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Humanproteindisulfide-isomeraseA3,PDIA3ELISAKit人蛋白二硫化物異構酶A3(PDIA3)ELISA試劑盒規格:96T/48T
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