產品名稱：蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物（含EDTA）1ml使用說明書
儲存條件：-20℃保存

有效期：一年

產品簡介：

本蛋白酶磷酸酶抑制劑混合物包含7種獨立的蛋白酶抑制劑AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、PepstatinA、Bestatin、E-64、EDTA，6種獨立的磷酸酶抑制劑CyclosporinA、SodiumFluoride、beta-GlycerophosphoricAcidDisodiumSalt、SodiumOrthovanadate、DisodiumMolybdateDihydrate、SodiumPyrophosphate

蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物（含EDTA）1ml使用說明書使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物（含EDTA）1ml使用說明書操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm，發射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物（含EDTA）1ml使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
黃花香茶菜Isodon sculponeata Sculponeatin O 黃花香茶菜素 O 1169806-00-1 C28H40O4 ≥95%

原人參二醇ProtopcncxcdiolHPLC≥98%;20mg/支

川續斷皂苷乙 Dipsacoside B 33289-85-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

中藥對照藥材白土苓(短柱肖菝葜)121537-200501TLC法鑒別

ISOFORSKOLIN 異佛斯可林純度：>95%
1794-55-4 維拉帕米相關物質B標準品 50mg

姜黃 Curcuma longa L. 莪術二同 13657-68-6 C15H24O2 ≥98% 石蠟(軟(Y000091

Balsalazide Related Compound A*相關物質A標準品100mg

rbital CII標準品 200mg

去氫鉤藤堿 630-94-4 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
紫*甙 Syringin (≥98%,HPLC) 118-34-3 20MG 標準品

油菜花分Rape flower 蕓苔素內酯 80483-89-2 C29H50O6 ≥98% 扶卡泥 雜質B

對照品鹽酸*100420-200301HPLC法含量測定用

*溶液混合物標準品50mg*溶液混合物標準品

臭牡丹Clerodendrum colebrookianum Cleroindicin E 長管假茉莉素E 165197-71-7 C8H14O3 ≥96%
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