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Western細胞裂解液100ml實驗方法

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更新時間:2017-07-04 14:38:49瀏覽次數:158次

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公司供應的Western細胞裂解液100ml實驗方法品種類齊全,檢測效果好,質量保證,歡迎廣大科研用戶!

產品名稱:Western細胞裂解液100ml實驗方法
儲存條件:裂解液室溫保存;蛋白酶抑制劑-20℃保存。

有效期:一年。

產品簡介:

Western組織細胞蛋白裂解液是一種在非變性條件下裂解細胞和組織的裂解液。能裂解細胞并充分釋放胞漿蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。裂解蛋白產物大限度地保留了蛋白的特性和功能。本裂解液裂解的細胞和組織樣本,主要用于Western,免疫沉淀和免疫共沉淀等。

Western細胞裂解液100ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Western細胞裂解液100ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Western細胞裂解液100ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer
廣玉蘭Magnolia grandiflora Spathulenol *烯醇 6750-60-3 C15H24O 97%

*Dioscin20mg/

遠志皂苷B;遠志精Ⅲ Onjisaponin B; Senegin III 20mg HPLC98% 用于含量測定

含量測定100770-200401常溫,避光100mg

本妥英相關物質B標準品6802-95-5 50mg
20(S)-原人參三醇 20(S)-protopanaxatriolthreealcohol 20mg

巴戟天隊照品Morindaofficinalishowcontrolproducts1g

Serpentine SERPENTINE 18786-24-8

川皮亭;蜜橘黃素川陳皮素478-01-3Nobiletin

衛矛醇;Dulcitol 608-66-2 20mg 訂購|咨詢
10-* 10-xy7noxycamptothecin 量:364.3500 編號:64439-81-2 分子式:C20H16N2O5 10-*--(10-xy7noxycamptothecin)的詳細信息 【藥理性質】10-*可選擇性地抑制拓撲異構酶(Topoisor-Merase)干擾DNA的復制。與其它常用的抗癌藥無交叉耐藥性,因而對耐藥性有效。*的抗癌作用相當于*的30倍,主要用于消化系統;胃癌、食道癌、結腸癌、直腸癌、肝癌等;對口腔、頸面部癌、頭頸部癌、頭頸部圓柱型腺癌及膀胱癌也有較好療效;對惡性葡萄胎,絨毛膜上皮癌、肺癌、急慢性粒細胞、白血病,銀屑病,治疣,及血吸蟲病引起的肝脾腫大等也具有一定的療效。

益母草 Leonurus sibiricus Stachydrine xy7nochloride 言酸水蘇減 4136-37-2 C7H14NO2.Cl 蜂毒肽(5862

含量測定鹽酸屈嗪100263-200301常溫,避光50mg

扶康唑相關物質C標準品514222-44-7 10mg

桑樹Morus alba L. Mulberroside A 桑皮苷A 102841-42-9 C26H32O14 98%
大鼠性激素結合球蛋白(SHBG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人細胞毒素相關蛋白A(CagA)免疫試劑盒 Human Cytotoxin-associated protein,CagA ELISA Kit

乙酰*酯酶(AchE)測試盒 可見分光光度法 50/48

RatParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISA試劑盒大鼠甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanImmuneRNA,IrnaELISA試劑盒人免疫核糖核酸(Irna)ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanMatrixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAKit人基質金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒規格:96T/48T
豚鼠主要組織相容性復合體(MHC/GPLA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Neonatal rat thyroxine (NN-T4) ELISA Kit 大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒

Humangrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit 人生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCrosslaps,CrELISA試劑盒人骨膠原交聯(Cr)ELISA試劑盒規格:96T/48T

組織DYRK1A激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

humanProstaglandinFPG-FELISAKit人前列腺素F(PGF)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Western細胞裂解液100ml實驗方法人抗核周因子抗體(APF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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