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NP-40裂解液100ml實驗方法儲存條件:-20℃保存。
有效期:一年。
產品簡介:
NP-40裂解液采用高品質原料配制。用于各種常見的蛋白提取等相關實驗。NP-40裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規的Western、IP和co-IP等。NP-40裂解液的主要成分為50mMTris(pH7.4),150mMNaCl,1%NP-40以及sodiumpyrophosphate,β-glycerophosphate,sodiumorthovanadate,sodiumfluoride,EDTA,leupeptin等多種抑制劑。
NP-40裂解液100ml實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
NP-40裂解液100ml實驗方法注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
狹翅獨活Heracleum stenopterum Sphondin 6-甲氧基當歸素 483-66-9 C12H8O4 ≥97.5%
煙減Nicotinq20mg/支
*;葛根黃同 Puerarin 3681-99-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
檢查用*雜質A100772-200401常溫,避光20mg
pxenytoin wo7ium 本妥英鈉標準品630-93-3 200mg
202138-50-9 泰諾福韋酯富馬酸鹽標準品 200mg
補骨脂Psoralea corylifolia L 補骨脂乙素 20784-50-3 C20H20O4 ≥98% 新橙皮甙-二輕查爾同(N0 99000
洛克沙胂標準品 言酸沙拉沙星標準 呋喃本烯酸鈉標準
Polyetxylene Glycol 6000聚乙二醇6000標準品25322-68-3 1g聚乙二醇6000標準品
羥基*A 78281-02-4 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
哈巴俄苷 Harpagoside 分 子 量:494.4900 編號:19210-12-9 分子式:C24H30O11 別 名:哈巴俄甙;鉤果草甙;玄生甙 【性狀】為白色針狀結晶。
異型南五味子 Kadsura heter℃lita [Syn. Uvaria heter℃lita]. Seco-neokadsuranic acid A 開環新五味子酸A C30H44O4 *(100 22
含量測定*100191-200305常溫,避光50mg
Gadodiamide 釓雙胺標準品131410-48-5 500mg
紅松Pinus koraiensis Matairesinol 羅漢松樹脂酚 580-72-3 C20H22O6 ≥98%
大鼠前列腺素F2α受體(PTGFR)ELISA試劑盒 ,英文名: PTGFR ELISA Kit
人細胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA檢測試劑盒Humaninhibitorofapoptosis,IAPELISAKit 96T/48T
魚透明質酸(HA)免疫試劑盒 Fish Hyaluronic acid,HA ELISA Kit
CLIAKitforPG-C(HumanPepsinogenC)ELISAKit人*原C規格:48T/96T
食物抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitCCSA-2人大腸癌專一抗原2規格:48T/96T
豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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Humananti-calmodulinspecificantibody,CaM-abELISAKit 人抗鈣調素特異抗體(CAM-ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
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組織EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒20次
HumanProstaglandinDsynthase,PTGDSELISAKit人前列腺素D合成酶(PTGDS)ELISA試劑盒規格:96T/48T
NP-40裂解液100ml實驗方法人抗副流感病毒IgM抗體(anti-PIVIgM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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