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高爾基體提取試劑盒100T實驗方法

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更新時間:2017-07-05 10:32:59瀏覽次數:223次

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高爾基體提取試劑盒100T實驗方法儲存條件:2-8℃保存。

有效期:一年。

產品簡介:

高爾基體(Golgiapparatus,Golgibodies)是由許多扁平的囊泡構成的以分泌為主要功能的細胞器。又稱高爾基器或高爾基復合體;高爾基體是由數個扁平囊泡堆在一起形成的高度有極性的細胞器。常分布于內質網與細胞膜之間,呈弓形或半球形,凸出的一面對著內質網稱為形成面(formingface)或順面(cisface)。凹進的一面對著質膜稱為成熟面(matureface)或反面(transface)。

高爾基體提取試劑盒100T實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
高爾基體提取試劑盒100T實驗方法注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
大葉藤黃Garcinia xanthochymus 1,4,6-Trixy7noxy-5-metxoxy-7-prenylxanthone 1,4,6-三羥基-5-甲氧基-7-異戊二烯基呫噸酮 160623-47-2 C19H18O6 95%

丹參速內wo7iumDcnshqnsuHPLC98%20mg/

黃華減 Thermopsine 486-90-8 20mg HPLC98% 用于含量測定

標準試劑庚烷磺酸鈉/

Soyasapogenol A大豆甾醇A純度:>98%
22630-25-7 錄本那敏相關物質B標準品USP雜質對照品(N/A) 10mg

Kopsia yunnanensis none 888482-17-5 C23H26N2O6 97% 葡甲安 - 對照譜圖(Y0000267

Tranexamic Acid 安甲環酸標準品1197-18-8 200mg

萬乃洛韋相關物質F標準品86150-61-0 25mg

酸棗仁皂苷A 55466-04-1 HPLC98%;20mg 訂購|咨詢
非洲馬鈴果Voacanga africana Tubotaiwine none 6711-69-9 C20H24N2O2 95%

異綠原醋AcISOchlorogqnicccid420-23-220mg

西伯利亞遠志糖A5 Sibiricose A5 107912-97-0 20mg HPLC98% 用于含量測定

標準品*140604-200623供*效價測定用

10-脫乙酰基巴卡丁III Deacetylbaccatin III 32981-86-5 20mg HPLC98% 用于含量測定
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