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植物線粒體蛋白提取試劑盒100T使用說明書

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更新時(shí)間:2017-07-05 10:55:51瀏覽次數(shù):124次

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產(chǎn)品名稱:植物線粒體蛋白提取試劑盒100T使用說明書
儲(chǔ)存條件:2-8℃保存。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡介:

線粒體(mitochondria)是真核細(xì)胞中產(chǎn)生能量的重要細(xì)胞器。細(xì)胞中的能源物質(zhì)—脂肪、

糖、部分氨基酸在此進(jìn)行終的氧化,并通過偶聯(lián)磷酸化生成ATP,供給細(xì)胞活動(dòng)之需。

植物線粒體蛋白提取試劑盒100T使用說明書使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
植物線粒體蛋白提取試劑盒100T使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
植物線粒體蛋白提取試劑盒100T使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer
狹葉獐牙菜Swertia angustifolia alpha-Tocopherolinoneone 托可醌 7559-4-8 C29H50O3 96%

染料木速GqnistqinHPLC98%20mg/

可可減 Theobromine 83-67-0 20mg HPLC98% 用于含量測定

對(duì)照品*δ-3異構(gòu)體130494-200402HPLC系統(tǒng)適應(yīng)性

松柏苷 Coniferin 531-29-3 20mg HPLC98% 松柏苷 531-29-3
25122-57-0 丁酸錄倍他松標(biāo)準(zhǔn)品 50mg

川芎嗪;2,3,5,6-四基吡嗪Ligustrezine;four2,3,5,6-metxylpyrezine114-11-4HPLC98%,20mg/

2''-Acetylastragalin 2''-乙酰基黃芪甙 1206734-95-3

Alprostadil*標(biāo)準(zhǔn)品745-65-325mg*標(biāo)準(zhǔn)品

蘇丹紅Ⅲ 85-86-9 HPLC98%;20mg 訂購|咨詢
青陽參苷元 Qingyang ginsengglucosideyuan 84745-94-8 20mg

*Etoposide33419-4-020mg

3,4-Dimetxoxypxenyl glucoside 3,4-二甲氧基本基-BETA-D-葡萄糖苷 84812-00-0

去氫二異*Dexy7nodiisoeugenol

山羊豆堿;Galegine 20284-78-0 20mg 訂購|咨詢
小鼠1號(hào)染色體開放閱讀框85(C1orf85)ELISA試劑盒 ,英文名: C1orf85 ELISA Kit

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