昆蟲跨膜蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱：昆蟲跨膜蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)
儲存條件：蛋白酶抑制劑-20℃保存；

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

哺乳動物跨膜蛋白承擔(dān)各種生物功能，在疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中扮演重要角色。跨膜蛋白樣品的制備需要充分考慮到與下游的膠分析及質(zhì)譜分析等應(yīng)用配套，因此跨膜蛋白樣本制備成為一個難以逾越的挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)制備跨膜蛋白樣品的方法是使用去污劑和表面活性劑增溶。去污劑處理會使跨膜蛋白喪失其天然結(jié)構(gòu)，因而妨礙了跨膜蛋白的功能研究。

昆蟲跨膜蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
昆蟲跨膜蛋白提取試劑盒100T售后服務(wù)實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
光葉巴豆Croton laevigatus Taraxerone 蒲公英賽酮 514-07-8 C30H48O ≥98.5%

遠(yuǎn)華蟾蜍精Tqlocinobufcgin1947-6-420mg

蓮心減 Liensinine 2586-96-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

含量測定*100859-200501常溫，避光100mg

5-去甲川陳皮素 5-Demetxylnobiletin 2174-59-6 20mg HPLC≥98% 5-去甲川陳皮素 2174-59-6
26159-34-2 耐普生鈉標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

三尖杉寧減Threesharpcedarbetteralkali20mg/支HPLC≥98%

Masticadienolic acid 熏陸香二烯同酸 472-30-0

Calcium Saccharate糖二酸鈣標(biāo)準(zhǔn)品5793-89-5200mg糖二酸鈣標(biāo)準(zhǔn)品

低聚果糖套裝(蔗果三糖;蔗果四糖;蔗果五 470-69-9，13133-07-8，59432-60-9 0.25g*3 訂購|咨詢
反* Linolelaidic acid 分 子 量：280.4500 編號：506-21-8 分子式：C18H32O2 別　　名：(反,反)-9,12-十八碳二烯酸 主要用途：

夜香牛Vernonia cinerea metxyl 2-(5-acetyl-2,3- dixy7nobenzofuran-2-yl)propenoate 2-(5-乙酰基-2,3-二輕本并呋喃-2-基)丙烯酸甲酯 617722-55-1 C14H14O4 PCB103 溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(3820

對照品重樓皂苷 Ⅶ111593-200402含量測定

阿斯巴甜相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品122822225mg阿斯巴甜相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品

吳茱萸Evodia rutaecarpa 1-xy7noxyrutaecarpine 1-羥基吳茱萸次堿 53600-24-1 C18H13N3O2 ≥98%
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