當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞生物學試劑>>蛋白提取/檢測>> 封閉液(Western)100ml免費代測
我司封閉液(Western)100ml免費代測本著標準*、質量*、服務*、信譽*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網上采購模式!我們將竭誠為您服務,咨詢!
封閉液(Western)100ml免費代測有效期:一年。
產品簡介:
Western 封閉液用于Western 時轉移了蛋白樣品的PVDF 膜或NC 膜的封閉。封閉后,可以減小后續的一抗或二抗和膜的非特異性結合,降低背景,增強信噪比。按照每張膜封閉需要5-10 毫升封閉液計算,一個包裝的Western 封閉液可以封閉10-20張膜。
封閉液(Western)100ml免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
封閉液(Western)100ml免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
菖蒲Acorus calamus Tatarinoid A none 1229005-35-9 C12H16O5 ≥95%
薏苡速Coixqnolidq23-91-20mg
流心酸 Lipoic acid 62-46-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
鑒別*100860-200501常溫,避光1000mg
當藥醇苷 Swertianolin 23445-00-3 20mg HPLC≥98% 23445-00-3用于含量測定
264624-38-6 脫氧升麻烴標準品 20mg
酪醇;隊羥基本醇;4-羥基本醇Tyrosol;p-xy7noxypxenyletxylalcohol;4-xy7noxybenzeneethanol201-94-0HPLC≥98%,20mg/支
Vibsanin C 葉含莢寧 C 74690-89-4
硫丙 標準品 號:35400-43-2 250mg
鹽酸白屈菜紅堿 3895-92-9 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
*相關物質A標準品 10mg
葉下珠Herba Phyllanthi Urinariae 柯里拉京 23094-69-1 C27H22O18 ≥98% 言酸本氧丙酚安;言酸異克舒令(I0900000
八錄二丙迷標準品 巴安靈標準品 巴毒靈標準品
Carbachol卡巴*標準品200mg卡巴*標準品
告達亭苷元 38395-02-7 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
大鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人鐵-過氧化物岐化酶(Fe-SOD)免疫試劑盒 Human Fe-Superoxide Dismutase,Fe-SOD ELISA Kit
β-半乳糖苷酶(β-GAL)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
Ratsolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISA試劑盒大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanKallikrein1,KLK1ELISA試劑盒人*1(KLK1)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanNephrinELISAKit人蛋白(nephrin)ELISA試劑盒規格:96T/48T
兔子白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human vascular endothelial cell growth factor receptor 3 (VEGFR-3) ELISA Kit 人血管內皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3)ELISA試劑盒
Humanα1-microglobulin,α1-MGELISAKit 人α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanEstriol,E3ELISA試劑盒人雌三醇(E3)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織SPHK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Humanorosomucoid,ORMELISAKit人類粘蛋白(ORM)ELISA試劑盒規格:96T/48T
封閉液(Western)100ml免費代測人α橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人α*S轉移酶(α-GST)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人α甘露糖苷酶(αManase)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人α干擾素-2b(IFN-α2b)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。