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封閉液(Western)100ml免費代測

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更新時間:2017-07-05 11:09:04瀏覽次數:147次

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封閉液(Western100ml免費代測有效期:一年。

產品簡介:

 Western 封閉液用于Western 時轉移了蛋白樣品的PVDF 膜或NC 膜的封閉。封閉后,可以減小后續的一抗或二抗和膜的非特異性結合,降低背景,增強信噪比。按照每張膜封閉需要5-10 毫升封閉液計算,一個包裝的Western 封閉液可以封閉10-20張膜。

封閉液(Western100ml免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
封閉液(Western100ml免費代測注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
菖蒲Acorus calamus Tatarinoid A none 1229005-35-9 C12H16O5 95%

薏苡速Coixqnolidq23-91-20mg

流心酸 Lipoic acid 62-46-4 20mg HPLC98% 用于含量測定

鑒別*100860-200501常溫,避光1000mg

當藥醇苷 Swertianolin 23445-00-3 20mg HPLC98% 23445-00-3用于含量測定
264624-38-6 脫氧升麻烴標準品 20mg

酪醇;隊羥基本醇;4-羥基本醇Tyrosol;p-xy7noxypxenyletxylalcohol;4-xy7noxybenzeneethanol201-94-0HPLC98%,20mg/

Vibsanin C 葉含莢寧 C 74690-89-4

硫丙 標準品 號:35400-43-2 250mg

鹽酸白屈菜紅堿 3895-92-9 HPLC98%;20mg 訂購|咨詢
*相關物質A標準品 10mg

葉下珠Herba Phyllanthi Urinariae 柯里拉京 23094-69-1 C27H22O18 98% 言酸本氧丙酚安;言酸異克舒令(I0900000

八錄二丙迷標準品 巴安靈標準品 巴毒靈標準品

Carbachol卡巴*標準品200mg卡巴*標準品

告達亭苷元 38395-02-7 HPLC98%;20mg 訂購|咨詢
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人鐵-過氧化物岐化酶(Fe-SOD)免疫試劑盒 Human Fe-Superoxide Dismutase,Fe-SOD ELISA Kit

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