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顯影定影試劑盒2加侖實(shí)驗(yàn)方法

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顯影定影試劑盒2加侖實(shí)驗(yàn)方法儲(chǔ)存條件:室溫保存。配制成溶液后,20-25℃保存,顯影液一個(gè)月有效,定影液兩個(gè)月內(nèi)有效。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡介:

顯影定影試劑盒是一個(gè)用于WesternNorthernSouthern等后續(xù)壓片后的洗片試劑。本試劑盒中的顯影和定影試劑的配方適合于X光片的顯影定影,對(duì)于普通的黑白底片或照片的顯影定影也適用。本顯影定影試劑盒不再需要其它任何試劑,只需加水*溶解并定容后,即可使用。本試劑盒可以配制1加侖(3.8)顯影液和1加侖(3.8)定影液。

顯影定影試劑盒2加侖實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
顯影定影試劑盒2加侖實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
7PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
尖頭瓶爾小草Ophioglossum pedunculosum Tetraxy7noepiberberine Sinactine 四氫表小檗堿 38853-67-7 C20H21NO4 95%

異數(shù)李速-3-O-半乳糖苷Isorhcmnqtin-3-O-gclcctosidcsq6743-9-620mg

馬錢苷;馬錢素; 馬錢子苷;番木鱉苷 Loganin 18524-94-2 20mg HPLC98% 用于含量測定

對(duì)照品*130523-200201含量測定

山姜素 Alpinetin 360
29110-48-3 鹽酸胍法辛標(biāo)準(zhǔn)品 125mg

*;蛇根草速;蛇根減;血安平;Reserpine;snakeroot;serpentine;bloodanping;20-22-2HPLC98%,20mg/

IsopiMaric acid ISOPIMARIC ACID 5835-26-7

得草 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):149979-41-9 100mg

異甜菊醇 27975-19-5 HPLC98%;20mg 訂購|咨詢
喜樹Camptotheca acuminata Vincosamide 喜果苷 23141-27-7 C26H30N2O8 95%

野皇芩苷Scutqllcrin7740-1-820mg

人參皂苷Re人參皂甙Re Ginsenoside Re 51542-56-4 20mg HPLC98% 用于含量測定

含量測定布*10098-200801常溫,避光100mg

表沒食子兒茶速?zèng)]食子酸酯 Epigallocatechin gallate;EGCG 989-51-5 20mg HPLC98% 用于含量測定
小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A6(S100A6)ELISA試劑盒 ,英文名: S100A6 ELISA Kit

人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA檢測試劑盒HumanGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit 96T/48T

大鼠和肽素(copeptin)免疫試劑盒 Rat Copeptin ELISA kit

英文名稱Rat15-lipoxygenaseELISAKit大鼠15-脂加氧酶(15-LO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

鄰氨基卞啶同(AMAC)熒光輔助糖蛋白電泳(FACE)檢測試劑盒5

vaspin人內(nèi)臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑規(guī)格:48T/96T
兔子Ⅰ型膠原(Col )ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human thrombus precursor protein (TpP) ELISA Kit 人血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒

HumanPolyADPribosepolymerase,PARPELISAKit 人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanfibrinopeptideB,FPBELISA試劑盒人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織β-內(nèi)酰胺酶報(bào)告基因活性生物發(fā)光法定量檢測試劑盒20

Humannonmethylatedoligonucleotide,NONELISAKit人非甲基化寡核苷酸(NON)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
顯影定影試劑盒2加侖實(shí)驗(yàn)方法6-羥多巴胺(6-OHDA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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