當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞生物學試劑>>蛋白提取/檢測>> 顯影定影試劑盒2加侖實驗方法
顯影定影試劑盒2加侖實驗方法儲存條件:室溫保存。配制成溶液后,20-25℃保存,顯影液一個月有效,定影液兩個月內有效。
有效期:一年。
產品簡介:
顯影定影試劑盒是一個用于Western、Northern、Southern等后續壓片后的洗片試劑。本試劑盒中的顯影和定影試劑的配方適合于X光片的顯影定影,對于普通的黑白底片或照片的顯影定影也適用。本顯影定影試劑盒不再需要其它任何試劑,只需加水*溶解并定容后,即可使用。本試劑盒可以配制1加侖(約3.8升)顯影液和1加侖(約3.8升)定影液。
顯影定影試劑盒2加侖實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
顯影定影試劑盒2加侖實驗方法注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
尖頭瓶爾小草Ophioglossum pedunculosum Tetraxy7noepiberberine Sinactine 四氫表小檗堿 38853-67-7 C20H21NO4 ≥95%
異數李速-3-O-半乳糖苷Isorhcmnqtin-3-O-gclcctosidcsq6743-9-620mg
馬錢苷;馬錢素; 馬錢子苷;番木鱉苷 Loganin 18524-94-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品*130523-200201含量測定
山姜素 Alpinetin 360
29110-48-3 鹽酸胍法辛標準品 125mg
*;蛇根草速;蛇根減;血安平;Reserpine;snakeroot;serpentine;bloodanping;20-22-2HPLC≥98%,20mg/支
IsopiMaric acid ISOPIMARIC ACID 5835-26-7
得草 標準品 號:149979-41-9 100mg
異甜菊醇 27975-19-5 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
喜樹Camptotheca acuminata Vincosamide 喜果苷 23141-27-7 C26H30N2O8 ≥95%
野皇芩苷Scutqllcrin7740-1-820mg
人參皂苷Re人參皂甙Re Ginsenoside Re 51542-56-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定布*10098-200801常溫,避光100mg
表沒食子兒茶速沒食子酸酯 Epigallocatechin gallate;EGCG 989-51-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
小鼠S100鈣結合蛋白A6(S100A6)ELISA試劑盒 ,英文名: S100A6 ELISA Kit
人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA檢測試劑盒HumanGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit 96T/48T
大鼠和肽素(copeptin)免疫試劑盒 Rat Copeptin ELISA kit
英文名稱Rat15-lipoxygenaseELISAKit大鼠15-脂加氧酶(15-LO)ELISA試劑盒規格:96T/48T
鄰氨基卞啶同(AMAC)熒光輔助糖蛋白電泳(FACE)檢測試劑盒5次
vaspin人內臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑規格:48T/96T
兔子Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human thrombus precursor protein (TpP) ELISA Kit 人血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒
HumanPolyADPribosepolymerase,PARPELISAKit 人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanfibrinopeptideB,FPBELISA試劑盒人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織β-內酰胺酶報告基因活性生物發光法定量檢測試劑盒20次
Humannonmethylatedoligonucleotide,NONELISAKit人非甲基化寡核苷酸(NON)ELISA試劑盒規格:96T/48T
顯影定影試劑盒2加侖實驗方法人6-羥多巴胺(6-OHDA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人5羥色胺轉運受體蛋白ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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