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蛋白提取液(Western)50ml使用說明書

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更新時間:2017-07-05 11:18:41瀏覽次數:254次

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蛋白提取液(Western)50ml使用說明書公司供應的細胞生物學試劑品種齊全,質量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購!

蛋白提取液(Western50ml使用說明書注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
蛋白提取液(Western50ml使用說明書儲存條件:提取液室溫保存。抑制劑-20℃保存。

有效期:一年。

產品簡介:

蛋白提取液對動物細胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強裂解作用,是經典常用的細胞組織快速裂解液。蛋白提取液得到的蛋白樣品可以用于常規的WesternIP等。蛋白提取液中已含常用磷酸酶抑制劑。

蛋白提取液(Western50ml使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
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茵芋減Skimmicninq83-92-420mg

馬錢苷酸;馬錢酸; 落干酸 Loganic acid 22255-40-9 20mg HPLC98% 用于含量測定

檢查用肌酐100877-200901常溫,避光100mg

小豆蔻明;豆蔻明 Cardamonin 19309-14-9 20mg H
29122-68-7 *系統適應標準品 5mg

仙鶴草(Agrimonia pilosa Ledeb) 仙鶴草酚B 55576-66-4 C37H46O12 98% 言酸毛果蕓香減;言酸匹魯卡品(P1650000

Splendoside 81969-41-7

Betaine xy7nochloride鹽酸甜菜堿標準品590-46-5200mg

杯莧甾酮 17086-76-9 HPLC98%;20mg 訂購|咨詢
*雜質H Ciprofloxacinimpurity H 50mg

野皇芩苷Scutqllcrin7740/1/8HPLC98%20mg/vial

異澤蘭黃素;澤蘭林素 Eupatilin 22368-21-4 20mg HPLC98% 用于含量測定

標準品三典甲腺原安酸150550-0004(原批號:550-0004)免疫測定用

槲皮苷;榭黃甙;槲皮甙;櫟素;橡皮苷 Quercitrin 522-12-3 20mg HPLC98% 用于含量測定
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