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蛋白濃縮試劑盒50T使用說明書儲存條件：試劑C和D 2-8°C保存；試劑A和B室溫保存。

有效期：一年。

產品簡介：

蛋白濃縮試劑盒適用于將稀釋的蛋白樣本定量濃縮成小容量。濃縮過程簡單方便，可在1小時內完成。濃縮的蛋白樣品可用于WesternBlooting、蛋白質電泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。

蛋白濃縮試劑盒50T使用說明書實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光；而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養液中，細胞培養液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
蛋白濃縮試劑盒50T使用說明書注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
菖蒲Acorus calamus Teuclatriol none 152110-17-3 C15H28O3 ≥95%

異葒草速Isooriqntin461-4-120mg

麥冬皂苷D';麥冬皂甙D' ophiopogonin D' 65604-80-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

含量測定雙錄芬酸鉀100880-200601常溫，避光100mg

丹參酮IIA-磺酸鈉 Sulfotanshinone wo7ium Injection 69659-80-9 20mg HPLC≥98% 用于含量
2921-57-5 甲基*龍琥珀酸酯標準品 200mg

刺柏Juniperus formosana 3-(2,4-二輕基本)丙酸 5631-68-5 C9H10O4 ≥90% *(P0550000

Cichoric Acid菊苣酸20mg/支HPLC≥98%

metxylcellulose (AS)甲基纖維素標準品9004-67-5 1g甲基纖維素標準品

* 98-92-0 HPLC≥99.5%;50mg 訂購|咨詢
*雜質E對照品標準品 ea

野甘草Scoparia dulcis 2,7-二輕基-2H-1,4-本并噁嗪-3(4H)-同 69804-59-7 C8H7NO4 ≥97% 睪同，用于雜質D鑒定(Y0000 2

Arsanilic Acid阿散酸標準品98-50-025mg

Tropicamide*標準品1508-75-4 200mg

河素 4368-28-9 HPLC≥99%;1mg 訂購|咨詢
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