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Caspase 1 活性檢測試劑盒50T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Caspase 1 活性檢測試劑盒50T使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Caspase 1 活性檢測試劑盒50T使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
A-431(人表皮癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0221SVEC4-10(小鼠淋巴結內皮細胞)5×106cells/瓶×2
CD160 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD160 人細胞裂解液 (陽性對照)
J-111細胞,單核細胞白血病細胞 人EB病毒轉化的B細胞,CGM1細胞 人細胞;Hela 229 [HeLa229]
恒河猴胚腎細胞;FRhK-4 [FRhK4]
NTRK2 Others Human 人 NTRK2 / Trk-B / TRKB 人細胞裂解液 (陽性對照)
長尾綠猴腎細胞;4647
IL21 Others Rat 大鼠 IL21 / Interleukin 21 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
小腸血管內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
獼猴皮膚細胞;MMS7 人淋巴胚胎性癌細胞,Cates-1B細胞 MDA-MB-453(癌細胞)
黑人Burkitt淋巴瘤細胞;RAJI
ICOS Others Human 人 ICOS / AILIM / CD278 人細胞裂解液 (陽性對照)
FGFBP3 Others Human 人 FGFBP3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
牛胚氣管細胞;EBTr (NBL-4)
CL-0169NCI-N87(人胃癌細胞)5×106cells/瓶×2
Caco-2,人結直腸腺癌細胞 腺癌*耐藥株,MEF-7/Adr細胞 SiHa(子細胞)
人癌細胞;MDA-MB-468
TF Others Human 人 Transferrin / TF 人細胞裂解液 (陽性對照)
鵝固醇調節元件結合蛋白-1(SREBP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血小板活化因子(PAF)免疫試劑盒 Human plaet activating factor,PAF ELISA Kit
人抗菌肽(CAMP)ELISA試劑盒 ,英文名: CAMP ELISA Kit
Ratinduciblenitricoxidesynthase,iNOSELISA試劑盒大鼠誘導型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Humanfreefattyacids,FFAELISA試劑盒人游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Humanintercellularadhesionmolecule1,ICAM-1ELISAKit人細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠環磷酸鳥苷(cGMP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat phosphorylated protein kinase C (P-PKC) ELISA Kit 大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒
humangonadotropin-releasinghormone,GnRHELISAKit 人*釋放激素(GnRH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humananti-myelinantibodyIgA,AMAIgAELISA試劑盒人抗髓磷脂抗體IgA(AMAIgA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
植物氫ATP酶(H+-ATPase)總活性比色法定量檢測試劑盒20次
humanuridinephosphorylase1,UPP1ELISAKit人*核苷磷酸化酶1(UPP1)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Caspase 1 活性檢測試劑盒50T使用說明書小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠二磷酸腺苷(ADP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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