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Annexin V-APC / PI 細胞凋亡檢測試劑盒50T實驗方法

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更新時間:2017-07-06 08:46:22瀏覽次數:318次

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Annexin V-APC / PI 細胞凋亡檢測試劑盒50T實驗方法公司供應的細胞生物學試劑品種齊全,質量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購!

Annexin V-APC / PI 細胞凋亡檢測試劑盒50T實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
Annexin V-APC / PI 細胞凋亡檢測試劑盒50T實驗方法注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
BGC823(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2

CL-0077Eca-109(人食管癌細胞)5×106cells/瓶×2

RAB27B Others Human RAB27B 人細胞裂解液 (陽性對照)

Wish細胞,人羊膜細胞系 T細胞淋巴瘤,Hat-78細胞 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A2

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163

CTSB Others Human Cathepsin-B / CTSB 人細胞裂解液 (陽性對照)
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1

IL1R1 Others Mouse 小鼠 IL1R1 / CD121a 人細胞裂解液 (陽性對照)

Jurkat(懸浮) 急性T淋巴細胞白血病

PC-3人前列腺癌細胞 Human prostate cancer PC-3 cells F-12培養基+10%FBS

SCG2 Protein Human 重組人 SCG2 / Secretogranin II 蛋白 (His 標簽)

小鼠腹脊髓神經細胞(MN-vsc)(1×106) lovo, 人結腸癌細胞 Human
ACVR2B Others Cynomolgus 食蟹猴 ACVR2B / ACTRIIB 人細胞裂解液 (陽性對照)

婆羅門牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-3

CL-0189Raji(Burkitt's淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2

Jurknt. Clone E6-1細胞,白血病細胞 急性T淋巴細胞白血病細胞,TALL-104細胞 人胰腺導管癌細胞;CFPAC-1

AAV-293(人胚腎細胞) 5×106cells/瓶×2

PVRL2 Others Human CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細胞裂解液 (陽性對照)
鵝超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血栓素B2(TXB2)免疫試劑盒 Human Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit

人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒 ,英文名: ATGA/TGAB ELISA Kit

RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1,IGFBP-1ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T

Humangalanin,GALELISA試劑盒人甘丙肽/甘丙素(GAL)ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanInterferonω,IFN-ωELISAKit人ω干擾素(IFN-ω/IFNB)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human renin (Renin) ELISA Kit 人腎素(Renin)ELISA試劑盒

humanaldosterone,ALDELISAKit 人醛固酮(ALD)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humananti-phospholipidantibody,Apl/APAELISA試劑盒人抗磷脂抗體(Apl/APA)ELISA試劑盒規格:96T/48T

植物細胞可溶性總核蛋白高純制備試劑盒10

Humantumournecrosisfactorrelatedweakinducerofapoptosis,TWEAKELISAKit人壞死因子相關弱凋亡誘導因子(TWEAK)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Annexin V-APC / PI 細胞凋亡檢測試劑盒50T實驗方法小鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白介素35IL-35ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白介素-33(IL-33)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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