Annexin V-APC / PI 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對(duì)于細(xì)胞懸液每50～100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
Annexin V-APC / PI 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測(cè)；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用，使用時(shí)需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí)，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
（7）PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
BGC823(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

CL-0077Eca-109(人食管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

RAB27B Others Human 人 RAB27B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

Wish細(xì)胞，人羊膜細(xì)胞系 人T細(xì)胞淋巴瘤,Hat-78細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2

中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163

CTSB Others Human 人 Cathepsin-B / CTSB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1

IL1R1 Others Mouse 小鼠 IL1R1 / CD121a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

Jurkat(懸浮) 急性T淋巴細(xì)胞白血病

PC-3人前列腺癌細(xì)胞 Human prostate cancer PC-3 cells F-12培養(yǎng)基+10%FBS

SCG2 Protein Human 重組人 SCG2 / Secretogranin II 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠腹脊髓神經(jīng)細(xì)胞(MN-vsc)(1×106) lovo, 人結(jié)腸癌細(xì)胞 Human
ACVR2B Others Cynomolgus 食蟹猴 ACVR2B / ACTRIIB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

婆羅門牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-3

CL-0189Raji(人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Jurknt. Clone E6-1細(xì)胞，白血病細(xì)胞 急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞,TALL-104細(xì)胞 人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;CFPAC-1

AAV-293(人胚腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

PVRL2 Others Human 人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
鵝超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血栓素B2(TXB2)免疫試劑盒 Human Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit

人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒 ，英文名： ATGA/TGAB ELISA Kit

RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1,IGFBP-1ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humangalanin,GALELISA試劑盒人甘丙肽/甘丙素(GAL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanInterferonω,IFN-ωELISAKit人ω干擾素(IFN-ω/IFNB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠過敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human renin (Renin) ELISA Kit 人腎素(Renin)ELISA試劑盒

humanaldosterone,ALDELISAKit 人醛固酮(ALD)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humananti-phospholipidantibody,Apl/APAELISA試劑盒人抗磷脂抗體(Apl/APA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物細(xì)胞可溶性總核蛋白高純制備試劑盒10次

Humantumournecrosisfactorrelatedweakinducerofapoptosis,TWEAKELISAKit人壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子(TWEAK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Annexin V-APC / PI 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法小鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白介素35（IL-35）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白介素-33(IL-33)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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