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Annexin V-APC / 7-AAD 細胞凋亡檢測試劑盒50T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Annexin V-APC / 7-AAD 細胞凋亡檢測試劑盒50T使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Annexin V-APC / 7-AAD 細胞凋亡檢測試劑盒50T使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
BIU-87(人膀胱癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0061CHO(倉鼠卵巢細胞)5×106cells/瓶×2
KCT2 Others Human 人 KCT2 / C5orf15 人細胞裂解液 (陽性對照)
A431細胞,表皮癌細胞系 人T淋巴細胞系,H9細胞 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4B
CST5 Others Human 人 CST5 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胃腺癌細胞;BGC-823
IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-H130人視網膜微血管內皮細胞*培養基100mL
MKN-28細胞,人胃癌細胞 人骨肉瘤細胞,U-2 OS細胞 幼蚊細胞;C6/36
DLD-1(人結腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CA9 Others Human 人 CA9 / CAIX 人細胞裂解液 (陽性對照)
FCGR2 Others Mouse 小鼠 CD32 / FCGR2B 人細胞裂解液 (陽性對照)
破骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
PK(15) 豬腎細胞
犬腎細胞系/野生型;MDCK/wild
GBC-SD, 人膽囊癌細胞
人低分化肺腺癌細胞;GLC-82 [GLC82] 大鼠食管上皮細胞*培養基 100mL
鵝白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血栓素A2合成酶(TX-A2)免疫試劑盒 Human Thromboxane-A2 Synthase(TX-A2 Synthase)ELISA Kit
人抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: TPO-Ab ELISA Kit
RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP-2ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Humangammaglutamyltranspeptidase,GGISA試劑盒人γ谷氨酰轉移酶(GGT)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Humaninterferon-inducibleprotein10,IP-10ELISAKit人干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human kidney injury molecule 1 (Kim-1) ELISA Kit 人腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒
humanHistamine,HISELISAKIT 人組胺(HIS)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humananti-PL7-antibodyELISA試劑盒人PL7抗體/抗蘇氨酰tRNA合成酶(PL7)ELISA試劑盒規格:96T/48T
植物細胞內氧化應激活性氧(ROS)高質熒光測定試劑盒20次
Humantumorspecifictransplantationantigen,TSTAELISAKit人特異性移植抗原(TSTA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Annexin V-APC / 7-AAD 細胞凋亡檢測試劑盒50T使用說明書小鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1Ra)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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