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活細胞/死細胞雙染試劑盒1000T實驗方法

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更新時間:2017-07-06 08:49:09瀏覽次數:425次

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公司供應的活細胞/死細胞雙染試劑盒1000T實驗方法品種類齊全,檢測效果好,質量保證,歡迎廣大科研用戶!

活細胞/死細胞雙染試劑盒1000T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
活細胞/死細胞雙染試劑盒1000T實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
活細胞/死細胞雙染試劑盒1000T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer
BT-549(人管癌細胞) 5×106cells/瓶×2

CL-0013A2780(人卵巢癌細胞)5×106cells/瓶×2

CD33 Others Human CD33 / Siglec-3 人細胞裂解液 (陽性對照)

KB細胞,人口腔表皮樣癌細胞 人血管內皮細胞,VE細胞 大鼠肝癌細胞;RH-35

大鼠骨髓瘤細胞;Y3-Ag 1.2.3

CNTN3 Others Human CNTN3 / Contactin-3 人細胞裂解液 (陽性對照)
原代骨細胞特制基礎無血清培養基Many types of cells包裝:500/100ml

IL18R1 Others Rat 大鼠 IL18R1 人細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠表皮角質形成細胞*培養基 100mL

HCT-8 [HRT-18]人回盲腸癌細胞 HCT-8 [HRT-18] human ileocecal carcinoma cells 1640+10% FBS

IFNG Protein Rat 重組大鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白 (Fc 標簽)

MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14) 5×106cells/瓶×2 CHO(中國倉鼠卵巢細胞)
KLK8 Others Human KLK-8 / Kallikrein-8 人細胞裂解液 (陽性對照)

氣道平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

PIEC 豬髖動脈內皮細胞

兔眼Tenon's囊成纖維細胞;RYTF

Raw264.7, 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞

人胃腺癌細胞;BGC-823 大鼠骨髓基質細胞*培養基 100mL
小鼠白介素13(IL13)ELISA試劑盒 ,英文名: IL13 ELISA Kit

人血清總補體(CH50)ELISA檢測試劑盒Human50%complementhemolysis,CH50ELISAKit 96T/48T

大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)免疫試劑盒 Rat A Disintegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISA Kit

英文名稱RatMGα1ELISAKit大鼠α1微球蛋白(MGα1)規格:96T/48T

咖啡環氨酸(cyclamate)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒20

ELISAKitFK人趨化因子規格:48T/96T
小鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human growth regulated oncogene beta / melanoma growth stimulating factor (GRO beta /CXCL 人生長調節致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL

HumanvisfatinELISAKit 人內脂素/內臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humananti-redcellantibodyELISA試劑盒人抗紅細胞抗體(RBC)ELISA試劑盒規格:96T/48T

植物細胞葉綠體DNA萃取試劑盒10/20

HumanTumornecrosisfactorβ,TNF-βELISAKit人壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒規格:96T/48T
活細胞/死細胞雙染試劑盒1000T實驗方法小鼠β內啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠β內啡肽(β-EP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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