活細胞/死細胞雙染試劑盒500T售后服務(wù)使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
活細胞/死細胞雙染試劑盒500T售后服務(wù)操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
活細胞/死細胞雙染試劑盒500T售后服務(wù)實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
BxPC-3(人原位胰腺腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2

CL-0005293T(人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2

SLAMF6 Others Human 人 SLAMF6 / Ly108 人細胞裂解液 (陽性對照)

KB/V細胞，人口腔上皮癌長春新堿耐藥株 人血管內(nèi)皮細胞,EC-304細胞 大鼠骨髓瘤細胞;Y3-Ag 1.2.3

大鼠肝癌細胞;CBRH-7919 [CBRH7919]

CNTN3 Others Human 人 CNTN3 / Contactin-3 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-C2

IL18R1 Others Rat 大鼠 IL18R1 人細胞裂解液 (陽性對照)

膀胱癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml

PAN-1細胞，胰腺導(dǎo)管上皮癌細胞 人細胞,HeLa-S3細胞 人小腦顆粒細胞總RNAHCGC tRNA

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-7

GB Others Cytomegalovirus/CMV 巨細胞病毒 HCMV gB 人細胞裂解液 (陽性對照)
PROCR Others Cynomolgus 食蟹猴 Epcr / PROCR 人細胞裂解液 (陽性對照)

氣道平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

正常小鼠Leydig細胞;TM3

LTEP-sm細胞，人小細胞肺癌細胞 小鼠皮膚細胞,JB6-C41細胞 CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞)5×106cells/瓶×2

TE-1(人食管癌細胞) 5×106cells/瓶×2

HUtMEC-c 人子宮微血管內(nèi)皮細胞(HUtMEC) 500,000cells 臍靜脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
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蝌蚪雌二醇(E2)免疫試劑盒 Tadpole Estradiol,E2 ELISA kit

CLIAKitforPPAR-Gamma(HumanPeroxisomeProliferator-activatedreceptorGamma)ELISAKit人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ規(guī)格：48T/96T

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