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改良Lillie-Mayer*100ml使用說明書

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更新時間:2017-07-06 09:09:53瀏覽次數:179次

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公司供應的改良Lillie-Mayer*100ml使用說明書品種類齊全,檢測效果好,質量保證,歡迎廣大科研用戶!

改良Lillie-Mayer*100ml使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
改良Lillie-Mayer*100ml使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應515min;
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
改良Lillie-Mayer*100ml使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer。
HCT 116(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B

ACVR1 Others Canine ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細胞裂解液 (陽性對照)

LS174T細胞,人結腸癌細胞 人黑色素瘤細胞,SK37細胞 人成骨肉瘤細胞;Saos-2

人永生化表皮細胞;HaCaT

APOA1 Others Human ApoAI 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0111HL-7702(人肝正常細胞)5×106cells/瓶×2

IgG2b Others Mouse 小鼠 IgG2b-Fc 人細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠胃粘膜上皮細胞*培養基 100mL

OP9小鼠骨髓基質細胞 OP9 mouse bone marrow stromal cells a-MEM培養基+20%FBS

LIF Protein Mouse 重組小鼠 LIF 蛋白 (His 標簽)

RT4(人膀胱移行細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 T-24(膀胱變移細胞癌)
DAPK1 Others Human DAPK1 / DAP Kinase 1 (aa 1-363) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人表皮黑色素細胞-HEM-a

兔角膜后基質層成纖維細胞;RCBBF

Y1細胞,腎上腺皮質細胞 人胰腺癌細胞,MIApaca-2細胞 CM-M008小鼠支氣管成纖維細胞*培養基100mL

大鼠骨肉瘤細胞;UMR-106

CDH4 Others Human R-Cadherin / CDH4 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血管內皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)免疫試劑盒 Human VEGFR-2/Flk-1 ELISA kit

人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒 ,英文名: ssDNA ELISA Kit

RatInterleukin4,IL-4ELISA試劑盒大鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanGlutathioneperoxidase,GSH-PxELISA試劑盒人*過氧化酶(GSH-Px)ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanIschemiaModifiedAlbumin,IMAELISAKit人缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠凋亡信號調節激酶I(ASK-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human myelin basic protein (MBP) ELISA Kit 人髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒

Humancoagulationfactor,FELISAKit 人*Ⅻ(F)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanArginase,ArgELISA試劑盒人*酶(Arg)ELISA試劑盒規格:96T/48T

植物源性食品核桃(walnut)基因檢測試劑盒20

HumanThyroglobulin,TGELISAKit人甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒規格:96T/48T
改良Lillie-Mayer*100ml使用說明書兔血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔血管內皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔血管緊張素Ⅱ(ANG-)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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