Hoechst33258染色液100T免費代測使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
Hoechst33258染色液100T免費代測操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm，發射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Hoechst33258染色液100T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
HCT-15(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2

非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-

ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細胞裂解液 (陽性對照)

CW-2細胞，人結腸癌細胞 人黑色素瘤細胞,A875細胞 人急性早幼粒白血病細胞;HL-60

人胚胎腸粘膜組織來源細胞;CCC-HIE-2

APCS Others Mouse 小鼠 APCS / SAP 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0103Hep G2(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2

IgG2a Others Mouse 小鼠 IgG2a-Fc 人細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠肝竇內皮細胞*培養基 100mL

RAG小鼠腎腺癌細胞 RAG mice renal adenocarcinoma cells MEM培養基(GIBCO)+10%FBS

LIF Protein Mouse 重組小鼠 LIF 蛋白 (Fc 標簽)

RTE(大鼠氣管上皮細胞) 5×106cells/瓶×2 A375(人類惡性黑色素瘤)
CD274 Others Rat 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照)

人表皮黑色素細胞-淺色素cDNAHEM-l cDNA

小鼠樹突狀細胞肉瘤低轉移細胞(綠色熒光蛋白標記);DG6-GFP

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B5 I型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL

Saos-2，人成骨肉瘤細胞 Human

TREM2 Others Mouse 小鼠 TREM2 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒 ，英文名： sICAM-1 ELISA Kit

人血管內皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA檢測試劑盒HumanVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2ELISAkit 96T/48T

鳥類催乳素(PRL/LTH)免疫試劑盒 Avian Prolactin/Luteotropic Hormone,PRL/LTH ELISA Kit

CLIAKitforOPGELISAKit大鼠骨保護素規格：48T/96T

糖化血清白蛋白(GSP)酶連續反應比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitIFN-ω人ω干擾素規格：48T/96T
小鼠凋亡相關因子配體(FASL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human triggering receptor expressed on myeloid cells -1 (TREM-1) ELISA Kit 人髓系細胞觸發受體-1(TREM-1)ELISA試劑盒

HumanChlamydiatrachomatis,CISAKit 人沙眼衣原體抗體(CT)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanargininevasopressin,AVPELISA試劑盒人*加壓素(AVP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

植物源性食品花生(peanut)基因檢測試劑盒20次

Humanthymus-leukemiaantigen,TLaELISAKit人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA試劑盒規格：96T/48T
Hoechst33258染色液100T免費代測兔纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔細胞間粘附分子1（ICAM-1）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔透明質酸(HA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔銅藍蛋白(CP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝