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線粒體深紅色熒光染色試劑盒BBcellProbe M021000T使用說明書

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更新時間:2017-07-06 09:12:22瀏覽次數:281次

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線粒體深紅色熒光染色試劑盒BBcellProbe M021000T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
線粒體深紅色熒光染色試劑盒BBcellProbe M021000T使用說明書注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
Hep G2(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2

大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-1

VEGFA Others Human VEGF121b / VEGF-A 人細胞裂解液 (陽性對照)

PA319細胞,人大腸癌細胞 人視網膜色素上皮細胞,D407細胞 人前列腺癌細胞;PC-3 [PC3]

人心臟微血管內皮細胞RNAHCMEC miRNA5 μg

ACY1 Others Mouse 小鼠 ACY1 / Aminoacylase-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
C3H/An小鼠結締組織細胞(L929-TK-);LTK-

IGFBP7 Others Human IGFBP7 / IBP-7 人細胞裂解液 (陽性對照)

MA891

BT-549人管癌細胞 BT-549 human breast duct carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

VSTM1 Protein Human 重組人 VSTM1 蛋白 (His 標簽)

人腎皮質近曲小管上皮細胞;HK-2 人肺大靜脈內皮細胞*培養基 100mL
CD86 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD86 / B7-2 人細胞裂解液 (陽性對照)

人表皮黑色素細胞-中色素HEM-m

兔晶體上皮細胞永生系;N/N1003A(RLE)

QG-56細胞,人肺扁平上皮癌細胞 中國倉鼠倉鼠卵巢細胞亞株,CHO-K1細胞 CM-M010小鼠肺大動脈平滑肌細胞*培養基100mL

Saos-2(人骨肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

Gibco 12558-011 TM-C100 Complete Medium,(system) 1 set
大鼠中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血管內皮細胞生長因子(VEGF165)免疫試劑盒 Human vascular endothelial cell growth factor,VEGF165 ELISA Kit

人抗存活素抗體/生存蛋白(Surv)ELISA試劑盒 ,英文名: Surv ELISA Kit

RatInterleukin6,IL-6ELISA試劑盒大鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanglutathioneS-transferases,GSTsELISA試劑盒人*S轉移酶(GSTs)ELISA試劑盒規格:96T/48T

Humanisletcellantibody,ICAELISAKit人胰島細胞抗體(ICA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠低密度脂蛋白(LDL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat urokinase (UK) ELISA Kit 大鼠*(UK)ELISA試劑盒

HumanHerpessimplexvirusantibody,HSV-AbELISAKit 人單純皰疹病毒Ⅰ型抗體(HSV-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAspartateaminotransferase,GOT/GPISA試劑盒人天*轉氨酶/谷草轉氨酶(GOT/GPT)ELISA試劑盒規格:96T/48T

植物源性食品山核桃(pecan)基因檢測試劑盒20

Humanthymidinephosphorylase,TPELISAKit人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
線粒體深紅色熒光染色試劑盒BBcellProbe M021000T使用說明書兔基質金屬蛋白9MMP-9ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔*(cAMP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔核因子κB受體活化因子配基(RANKLELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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