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內質網BBcellProbe E01熒光染色試劑盒250T實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
內質網BBcellProbe E01熒光染色試劑盒250T實驗方法注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
HK-2(人腎小管上皮細胞) 5×106cells/瓶×2
盤羊皮膚細胞;OAM-S1
CDH2 Others Human 人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 人細胞裂解液 (陽性對照)
DLD-1細胞,人結直腸腺癌上皮細胞 人視網膜母細胞瘤,Y79細胞 人導管癌細胞;ZR-75-30
人真皮成纖維細胞-新生兒RNAHEF-n miRNA5 μg
ACVR2B Others Human 人 ACVR2B / ActivinR-IIB 人細胞裂解液 (陽性對照)
人APP基因轉染CHO細胞株;7WD10
IGFBP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP3 人細胞裂解液 (陽性對照)
肝實質細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
MOLT-4細胞,人急性T淋巴母細胞白血病細胞 大鼠卵巢癌細胞株,NUTU-19細胞 人外根殼細胞cDNAHHORSC cDNA
NCTC 1469(小鼠正常肝細胞) 5×106cells/瓶×2
COLO 205(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0158MGC80-3(人胃癌細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠肝細胞;BRL
VIPR2 Others Human 人 VIPR2 / VPAC2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人表皮角質細胞-胎兒HEK-f
兔眼Tenon's囊成纖維細胞;RYTF
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1 腺癌細胞,SK-BR-3細胞 RK-13細胞,兔腎細胞系
SGC-7901, 人胃腺癌細胞系 Human
CPB2 Others Human 人 CPB2 / Carboxypeptidase-B2 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠肌紅蛋白(MYO)ELISA試劑盒 ,英文名: MYO ELISA Kit
人血管緊張肽酶(Angiotensinase)ELISA檢測試劑盒HumanAngiotensinaseELISAKit 96T/48T
大鼠硒蛋白P(SEPP1)免疫試劑盒 Rat selenoprotein P, plasma, 1 (SEPP1)ELISA kit
英文名稱RatcardiactroponinIELISAKit大鼠心肌肌鈣蛋白I(cTNI)ELISA試劑盒規格:96T/48T
海洋動物種系COI-5基因擴增分析試劑盒20次
ELISAKitFbg人血纖蛋白原規格:48T/96T
小鼠膽囊收縮素8(CCK-8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat thrombin receptor (TR) ELISA Kit 大鼠*受體(TR)ELISA試劑盒
HumanN-terminalpro-brainnatriureticpeptide,NT-proBNPELISAKIT 人N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanAtrialNatriureticPeptide,ANPELISA試劑盒人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
植物源性食品羽扇豆(lupine)基因檢測試劑盒20次
HumanThrombopoietin,TPOELISAKit人血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒規格:96T/48T
內質網BBcellProbe E01熒光染色試劑盒250T實驗方法山羊壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊血小板衍化生長因子(PDGF)ELISA試劑盒 組裝/原裝
山羊生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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