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更新時間:2017-07-06 09:16:58瀏覽次數(shù):124次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網細胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實驗方法
福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
細胞內氯離子染色試劑盒500T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
細胞內氯離子染色試劑盒500T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細胞內氯離子染色試劑盒500T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
HMy2.CIR(人B淋巴母細胞) 5×106cells/瓶×2
犬腎細胞;MDCK(NBL-2)
IL23 Others Marmoset 狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照)
HRC-99細胞,人直腸腺癌細胞系 人眼脈絡黑色素瘤細胞,C918細胞 小鼠胚胎成纖維細胞(來自NIH3T3);PA12
人脈絡叢內皮細胞RNAHCPEC miRNA5 μg
ACVRL1 Others Human 人 ALK-1 / ACVRL1 人細胞裂解液 (陽性對照)
晶狀體上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
IGF2BP2 Others Human 人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人腎透明細胞癌;Caki-1
NK-92細胞,人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞 人肝癌細胞系,Hep-3B細胞 CL-0184PANC-1(人胰腺癌細胞)5×106cells/瓶×2
中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24
SLAMF1 Others Human 人 CD150 人細胞裂解液 (陽性對照)
ITGA5 & ITGB1 Others Human 人 ITGA5 & ITGB1 Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照)
人表皮角質細胞總RNAHEK tRNA
KYSE30 人食管癌細胞
CL-0320BC3H1(小鼠腦瘤細胞)5×106cells/瓶×2
RN-c, 大鼠皮質神經元
人胚胎心臟成纖維樣細胞;HEH2 人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠脂肪酸合成酶(FAS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管緊張素原(aGT)免疫試劑盒 Human aGT ELISA Kit
人抗表皮細胞基底膜抗體(EBMZ)ELISA試劑盒 ,英文名: EBMZ ELISA Kit
Ratintestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISA試劑盒大鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISA試劑盒人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanKallikrein1,KLK1ELISAKit人*1(KLK1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠*7α-羥化酶(CYP7A1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human placental alkaline phosphatase (PLAP) ELISA Kit 人胎盤堿性磷酸酶(PLAP)ELISA試劑盒
Humananti-thrombinreceptor,ATRELISAKit 人抗*受體(ATR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
humanAzidothymidine,AZISA試劑盒人*(AZT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物源性飼料處理試劑盒20次
Humanthrombin-antithrombincomplex,TAISAKit人*抗*復合物(TAT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細胞內氯離子染色試劑盒500T免費代測山羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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