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細胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實驗方法
福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
Pluronic F-127 100mg免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
Pluronic F-127 100mg免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
HSC-T6(大鼠肝星形細胞) 5×106cells/瓶×2
豚鼠胚胎細胞;104C1
LAMP2 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP2 人細胞裂解液 (陽性對照)
AsPc-1細胞,人轉移胰腺癌細胞 人正常皮膚細胞,HaCaT細胞 小鼠T淋巴細胞;Cl.Ly1+2-/9
人心肌細胞總RNAHCM tRNA
Gibco 17101015 Collagenase Type II 1g
牛腎細胞;MDBK
IFNGR1 Others Mouse 小鼠 IFNGR1 / CD119 人細胞裂解液 (陽性對照)
HT1080 人成纖維肉瘤細胞
UM-UC-3人膀胱移行細胞癌 UM-UC-3 human bladder transitional cell carcinoma MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS
FIGF Protein Mouse 重組小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標簽)
大鼠心肌細胞(RCM)(1×106) Ca Ski, 人細胞 Human
PLAUR Others Human 人 uPAR / CD87 人細胞裂解液 (陽性對照)
人腸微血管內皮細胞cDNAHIMEC cDNA
3T6 Swiss albion小鼠胚胎成纖維細胞
CL-0230Tca-8113(人舌鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2
MN-s, 小鼠紋狀體神經元
表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞;293KB 人輸尿管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠脂多糖(LPS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管緊張素Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)免疫試劑盒 Human angiotension Ⅱ receptor 1 Antibody,ATⅡR1 Ab ELISA Kit
人抗α干擾素抗體(IFNα-Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: IFNα-Ab ELISA Kit
RatKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISA試劑盒大鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanglycophosphatidylinositol,GPIELISA試劑盒人糖磷脂酰肌醇(GPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanKallikrein6,KLK6ELISAKit人*6(KLK6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat coagulation factor III (F III) ELISA Kit 大鼠*Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒
Humanlipoproteinα,Lp-αELISAKit 人脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanBcellgrowthprotein,BCGFELISA試劑盒人B細胞生長因子(BCGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物源性飼料玉米基因檢測試劑盒20次
HumanThioredoxin,TrxELISAKit人硫氧化還原蛋白(Trx)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Pluronic F-127 100mg免費代測人總鐵結合力(TIBC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人總前列腺特異抗原(tPSA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人總抗氧化能力(T-AOC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人總蛋白(TP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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