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更新時間:2017-07-06 09:25:58瀏覽次數(shù):221次
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細胞糖原PAS染色試劑盒4×20ml免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
細胞糖原PAS染色試劑盒4×20ml免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細胞糖原PAS染色試劑盒4×20ml免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
L6(大鼠成肌細胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠胚胎成纖維細胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)
IFNG Others Ferret 雪貂 IFNG / Interferon Gamma 人細胞裂解液 (陽性對照)
Bel-7405細胞,人肝癌細胞 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝用的人胚胎成纖維細胞,PA317細胞 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21
人表皮黑色素細胞-深色素cDNAHEM-d cDNA
Promocell C-28013 Mesenchymal Stem CellOsteogenic Different. Medium, 間充質(zhì)干細胞成骨分化培養(yǎng)基(即用型) 100ml
人滋養(yǎng)層絨毛細胞裂解物HVTL
IFNA8 Others Human 人 Interferon alpha-B / IFNA8 人細胞裂解液 (陽性對照)
BALB/C小鼠肝上皮細胞;BNL 1ME A.7R.1
QSG-7701細胞,人胚肝細胞正常 人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株,7WPS1細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆); EPO-CHO-T
LLC-MK2(恒河猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell Drosophila Schneider's Drosophila Medium果蠅培養(yǎng)基,無L-* 500ml
人表皮淋巴內(nèi)管皮細胞(HDLEC)(5×105)
人非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H2087
HUVEC-12, 人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞系
人Burkkit淋巴瘤細胞;Daudi 大鼠腎小球內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
MMQ 小鼠垂體瘤細胞
FETUB Others Human 人 Fetuin-B / FETUB 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠載脂蛋白A2(apo-A2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人雄(ASD)免疫試劑盒 Human Androstenedione,ASD ELISA Kit
人抗BP180抗體(BP180-Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: BP180-Ab ELISA Kit
RatLeukotrieneC4,LT-C4ELISA試劑盒大鼠白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumangranzymesA,Gzms-AELISA試劑盒人顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLDL-ICELISAKit人低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat prostaglandin E1 (PGE1) ELISA Kit 大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒
Humancirculatingimmunecomplex,CICELISAKit 人循環(huán)免疫復合物(CIC)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanbeta-siteAPP-cleavingenzyme2,BACE2ELISA試劑盒人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物總RNA純化試劑盒(高多糖/酚)20次
HumanSurfactantProteinA,SP-AELISAKit人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細胞糖原PAS染色試劑盒4×20ml免費代測人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人幽門螺旋桿菌熱休克蛋白60(HP-HSP60)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人優(yōu)球蛋白(EL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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