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淀粉樣物質(zhì)染色試劑盒(Bennhold剛果紅法)5×50ml使用說明書

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更新時(shí)間:2017-07-06 09:26:53瀏覽次數(shù):163次

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淀粉樣物質(zhì)染色試劑盒(Bennhold剛果紅法)5×50ml使用說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
淀粉樣物質(zhì)染色試劑盒(Bennhold剛果紅法)5×50ml使用說明書注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
Li-7(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

小鼠肝癌瘤株;H22

NRN1L Others Human NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

GBC-SD細(xì)胞,人膽囊癌細(xì)胞 APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株,7WD10細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1

人腦血管平滑肌細(xì)胞cDNAHBVSMC cDNA

Promocell C-28019 MSC Growth Medium DXF, 間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基DXF—無血清培養(yǎng)基 500ml
原代腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml

IFNA8 Others Cynomolgus 食蟹猴 Interferon alpha-B / IFNA8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS2

Calu-6細(xì)胞,人肺癌細(xì)胞系(未分化) 大鼠肝星形細(xì)胞,CFSC-2G細(xì)胞 CM-M097小鼠皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

SK-BR-3(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HUAEC-c 人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUAEC) 500,000cells 腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
大鼠背部脊髓神經(jīng)元(RDSCI)(1×106)

人肺成纖維細(xì)胞;HFL1

蚊子幼蟲體細(xì)胞;Aedes albopictus clone C6/36

615小鼠肺癌瘤株;HP615 小鼠膀胱上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞 Mouse

IL12RB2 Others Mouse 小鼠 IL12RB2 / IL12R-beta 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人雄激素受體(AR)免疫試劑盒 Human androgen receptor,AR ELISA Kit

人抗BB抗體(BB-Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: BB-Ab ELISA Kit

Ratlipolysaccharidebindingprotein,LBPELISA試劑盒大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanGrowthHormoneBindingProtein,PELISA試劑盒人生長(zhǎng)激素結(jié)合蛋白(P)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

humanlectin-galactosebinding-soluble3,Lgals3ELISAKit人可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集素3(Lgals3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human glucocorticoid receptor beta (GR- beta) ELISA Kit 人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒

HumanApolipoproteinE,Apo-EELISAKit 人載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanBladdertumorantigen,BTAELISA試劑盒人膀胱抗原(BTA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物總氨基酸含量熒光定量檢測(cè)試劑盒20

HumansubstancePreceptor,SP-RELISAKitP物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
淀粉樣物質(zhì)染色試劑盒(Bennhold剛果紅法)5×50ml使用說明書人乙型腦炎病毒抗體(JE-AbELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBVpreS2Ag)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBVpreS2Ab)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人乙型肝炎病毒前S1抗原(HBVpreS1Ag)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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