一氧化氮合酶染色試劑盒2×20ml使用說明書使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
一氧化氮合酶染色試劑盒2×20ml使用說明書操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm，發射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
一氧化氮合酶染色試劑盒2×20ml使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
MDA-MB-231(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2

人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;MuM-2C

GFRA1 Others Rat 大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人細胞裂解液 (陽性對照)

9204細胞，人肝癌細胞 大鼠嗜堿性細胞白血病細胞,RBL-2H3細胞 山羊腎上皮樣細胞;DG-K1

人真皮淋巴內皮細胞裂解物HDLECL

Promocell C-22120 Endothelial Cell GrowthMedium MV KIT, 內皮細胞生長培養基MV套裝 500ml
人膀胱平滑肌細胞總RNAHBdSMC tRNA

IFNA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細胞裂解液 (陽性對照)

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA

AR42J細胞，人胰腺細胞 人皮膚成纖維細胞系,BJ細胞 小鼠神經母細胞瘤細胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]

HT-29(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2

Gibco 17105041 *Dispase II, powder 5 g
小鼠周神經成纖維細胞(MPNF)(5×105)

人肺動脈內皮細胞總RNAHPAEC tRNA

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-p7

小鼠結締組織L細胞株929克隆;L-929 [L929] 小鼠視網膜色素上皮細胞*培養基 100mL

293A，人胚腎上皮細胞系(腺病毒包裝級別) Human

CD24 Others Human 人 CD24 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)免疫試劑盒 Human thymidinephosphorylase,TP ELISA Kit

卷曲蛋白8(FZD8)ELISA試劑盒 ，英文名： FZD8 ELISA Kit

Ratlowdensitylipoprotein,LDLELISA試劑盒大鼠低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Humangrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISA試劑盒人生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒規格：96T/48T

HumanLeishimariaantibodyELISAKit人利什曼原蟲抗體(LeishimariaAb)ELISA試劑盒規格：96T/48T
小鼠酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

One set of membrane protein (iNV) ELISA Kit 人套膜蛋白(iNV)ELISA試劑盒

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植物組織胞漿超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)分離試劑盒50次

HumanStaphylococalproteinA,SPAELISAKit人葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA試劑盒規格：96T/48T
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