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更新時間:2017-07-06 09:34:51瀏覽次數(shù):163次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實驗方法
福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
阿利新藍染色試劑盒(pH2.5)3×50ml售后服務(wù)使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
阿利新藍染色試劑盒(pH2.5)3×50ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
阿利新藍染色試劑盒(pH2.5)3×50ml售后服務(wù)實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
MRC-5(人胚肺成纖維細胞 ) 5×106cells/瓶×2
人前列腺癌細胞;LNCaP
SELP Others Mouse 小鼠 SELP / selectin P / P-selectin 人細胞裂解液 (陽性對照)
HuH7-HCV細胞,人感染HCV肝癌細胞 小鼠癌高轉(zhuǎn)移細胞,MA-891細胞 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-7
前脂肪細胞分化生長添加物PAdDS
Promocell C-23130 Fibroblast Growth Medium 3KIT, 成纖維細胞生長培養(yǎng)基3型套裝 500ml
CM-H089人髂動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL
IFNA13 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA13 / Interferon alpha-13 人細胞裂解液 (陽性對照)
人腸微血管內(nèi)皮細胞HIMEC
HS68細胞,人男性正常細胞系 大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞,RBL-1細胞 平滑肌細胞培養(yǎng)基SMCM
MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14) 5×106cells/瓶×2
AGS(人胃腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R051大鼠子宮頸上皮細胞*培養(yǎng)基100mL 人支氣管上皮樣細胞;BEAS-2B
SELP Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 人細胞裂解液 (陽性對照)
人肺泡上皮細胞cDNAHPAEpiC cDNA
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-D3
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-B1 *-EDTA(含10mL 酶解緩沖液) 1mL
MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人癌細胞 Human
CHST15 Others Human 人 CHST15 / BRAG 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠抑制素A(INH-A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胸苷酸合成酶(TS)免疫試劑盒 Human thymidylate synthetase,TS ELISA Kit
NADH氧化酶(NOX)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
Ratlymphocytefunctionassociatedantigen3,LFA-3ELISA試劑盒大鼠淋巴細胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanGTPaseactivatingprotein,GAPELISA試劑盒人GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLeucineaminopepridase,LAPELISAKit人亮氨酰氨基肽酶(LAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human homocysteic acid (Hcy) ELISA Kit 人同型半*(Hcy)ELISA試劑盒
Humanapoptosissignalregulatingkinase1,ASK-1ELISAKit 人凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanBullousPemphigoid,BPELISA試劑盒人大皰性類天皰瘡抗體(BP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20次
HumansolubleTumorNecrosisFactorαreceptor,sTNFαRELISAKit人可溶性壞死因子α受體(sTNFαR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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