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更新時間:2017-07-06 09:39:16瀏覽次數(shù):140次
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Mallory磷鎢酸蘇木素染色試劑盒(PTAH自然氧化法)300ml免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Mallory磷鎢酸蘇木素染色試劑盒(PTAH自然氧化法)300ml免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Mallory磷鎢酸蘇木素染色試劑盒(PTAH自然氧化法)300ml免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
NCI-H292(人肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMYM
CD33 Others Human 人 CD33 / Siglec-3 人細胞裂解液 (陽性對照)
HNE1細胞,人鼻咽癌細胞 小鼠骨髓瘤細胞,FO細胞 CM-H006人肺動脈成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基MSCM-prf
Promocell C-26001 Renal Epithelial Cell GrowthMedium , 腎上皮細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml
CL-0424RK1(大鼠腎細胞)5×106cells/瓶×2
ICOSLG Others Human 人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 人細胞裂解液 (陽性對照)
人內(nèi)根殼細胞RNAHHIRSC miRNA5 μg
QBC939細胞,人膽管癌細胞 褐鼠胰島素瘤上皮細胞,RIN-m細胞 NIH/3T3, 小鼠成纖維細胞系
MA-891(小鼠癌高轉(zhuǎn)移細胞) 5×106cells/瓶×2
NHEK adult pooled Pellet 正常人類表皮角質(zhì)細胞團塊(捐獻者,混合來源) > 1 mio.cells 雪旺細胞培養(yǎng)基SCM
CD33 Others Human 人 CD33 / Siglec-3 人細胞裂解液 (陽性對照)
人肺微血管內(nèi)皮細胞RNAHPMEC miRNA5 μg
豬腎傳代細胞;IBRS-2
LS180細胞,人結(jié)腸腺癌細胞 人眼脈絡黑色素瘤細胞,MuM-2B細胞 人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]
HGC-27(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CD244 Others Human 人 2B4 / SLAMF / CD244 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠破骨細胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒 ,英文名: ODF ELISA Kit
人信號轉(zhuǎn)導分子(Smad1)ELISA檢測試劑盒Humansignaltransduction-Smad1ELISAKit 96T/48T
魚免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒 Fish immunoglobulin A,IgA ELISA kit
CLIAKitforpERKELISAKit大鼠磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶規(guī)格:48T/96T
食物污染ATP生物發(fā)光法定量檢測試劑盒50次
ELISAKitPACAP人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽規(guī)格:48T/96T
小鼠白三烯C4(LTC4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human hyaluronic acid binding protein (HABP) ELISA Kit 人透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA試劑盒
Humanphospho-extracellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit 人磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancalcineurin,CaNELISA試劑盒人鈣調(diào)磷酸酶(CaN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
質(zhì)譜分析20樣本
HumanSolubleprotein-100B,S-100BELISAKit人S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Mallory磷鎢酸蘇木素染色試劑盒(PTAH自然氧化法)300ml免費代測人雄烯二(ASD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人雄激素受體(AR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人雄激素結(jié)合蛋白(ABP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胸腺依賴性抗原(TD-Ag)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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