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改良Weigert彈力纖維染色試劑盒250ml實驗方法

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更新時間:2017-07-06 09:43:03瀏覽次數(shù):123次

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公司供應(yīng)的改良Weigert彈力纖維染色試劑盒250ml實驗方法品種類齊全,檢測效果好,質(zhì)量保證,歡迎廣大科研用戶!

改良Weigert彈力纖維染色試劑盒250ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
改良Weigert彈力纖維染色試劑盒250ml實驗方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
改良Weigert彈力纖維染色試劑盒250ml實驗方法實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer
P388D1(小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

人胎兒胸腺細(xì)胞株;HFT-8810 [HFT8810]

CDH8 Others Rat 大鼠 Cadherin-8 / CDH8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

FD4細(xì)胞,人淋巴細(xì)胞與倉鼠肺細(xì)胞雜交細(xì)胞 小鼠畸胎瘤細(xì)胞,F9細(xì)胞 CM-H095人骨骼肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞MEF

Promocell C-27436 Preadipocyte DifferentiationMedium, 前脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基(即用型) 500ml
CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

HGF Others Human HGF / Hepatocyte Growth Factor CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人食道平滑肌細(xì)胞裂解物HESMCL

水貂肺上皮細(xì)胞;Mv.1.Lu(NBL-7) T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞,Jurkat,Clone E6-1細(xì)胞 MPC-83細(xì)胞,小鼠胰腺腺泡細(xì)胞癌細(xì)胞

人肝永生化細(xì)胞;THLE-3

COCH Others Human COCH / Cochlin ( isoform short ) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
SERPINA6 Others Human SerpinA6 / CBG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞HHSEC

HSF 人皮膚成纖維樣細(xì)胞

CM-H131人角膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

QGY-7701, 人肝癌細(xì)胞

人肺癌細(xì)胞;A549 [A-549] 人腦成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠胰淀素(Amylin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(ZnT4)免疫試劑盒 Human zinc transporter 4,ZnT4 ELISA Kit

6-磷酸葡糖糖酸脫氫酶(6PGDH)測試盒 紫外分光光度法 50/48

Ratmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/AgB/H-1ELISA試劑盒大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHC/AgB/H-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISA試劑盒人熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanLeukotrieneC4LT-C4ELISAKit人白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human deoxyribonuclease I (DNase- I) ELISA Kit 人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-)ELISA試劑盒

Human1,25-dihydroxyvitaminD3,DVD/DHVD3ELISAKit 1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD3)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancarbohydrate-deficienttransferrin,CDISA試劑盒人糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

重組腺病毒PCR鑒定試劑盒20

HumansolubleE-selectinsE-selectinELISAKit人可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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