改良Weigert彈力纖維染色試劑盒250ml實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
改良Weigert彈力纖維染色試劑盒250ml實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm，發射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
改良Weigert彈力纖維染色試劑盒250ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
P388D1(小鼠淋巴樣瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

人胎兒胸腺細胞株;HFT-8810 [HFT8810]

CDH8 Others Rat 大鼠 Cadherin-8 / CDH8 人細胞裂解液 (陽性對照)

FD4細胞，人淋巴細胞與倉鼠肺細胞雜交細胞 小鼠畸胎瘤細胞,F9細胞 CM-H095人骨骼肌細胞*培養基100mL

小鼠胚胎成纖維細胞MEF

Promocell C-27436 Preadipocyte DifferentiationMedium, 前脂肪細胞分化培養基(即用型) 500ml
CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內皮細胞)5×106cells/瓶×2

HGF Others Human 人 HGF / Hepatocyte Growth Factor CHO細胞裂解液 (陽性對照)

人食道平滑肌細胞裂解物HESMCL

水貂肺上皮細胞;Mv.1.Lu(NBL-7) T淋巴細胞白血病細胞，Jurkat,Clone E6-1細胞 MPC-83細胞，小鼠胰腺腺泡細胞癌細胞

人肝永生化細胞;THLE-3

COCH Others Human 人 COCH / Cochlin ( isoform short ) 人細胞裂解液 (陽性對照)
SERPINA6 Others Human 人 SerpinA6 / CBG 人細胞裂解液 (陽性對照)

人肝竇內皮細胞HHSEC

HSF 人皮膚成纖維樣細胞

CM-H131人角膜成纖維細胞*培養基100mL

QGY-7701, 人肝癌細胞

人肺癌細胞;A549 [A-549] 人腦成纖維細胞*培養基 100mL
大鼠胰淀素(Amylin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人鋅轉運蛋白4(ZnT4)免疫試劑盒 Human zinc transporter 4,ZnT4 ELISA Kit

6-磷酸葡糖糖酸脫氫酶(6PGDH)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣

RatmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/AgBⅡ/H-1ⅡELISA試劑盒大鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA試劑盒規格：96T/48T

HumanHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISA試劑盒人熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒規格：96T/48T

HumanLeukotrieneC4，LT-C4ELISAKit人白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒規格：96T/48T
小鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human deoxyribonuclease I (DNase- I) ELISA Kit 人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA試劑盒

Human1,25-dihydroxyvitaminD3,DVD/DHVD3ELISAKit 人1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD3)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancarbohydrate-deficienttransferrin,CDISA試劑盒人糖缺失性轉鐵蛋白(CDT)ELISA試劑盒規格：96T/48T

重組腺病毒PCR鑒定試劑盒20次

HumansolubleE-selectin，sE-selectinELISAKit人可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒規格：96T/48T
改良Weigert彈力纖維染色試劑盒250ml實驗方法人細胞外信號調節激酶(ERK)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人細胞外基質磷酸糖蛋白(MEPE)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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